GBclonart 无缝组装（GBclonart Seamless Assembly Kit ）.PDFVIP

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2017-07-03 发布于天津
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GBclonart 无缝组装（GBclonart Seamless Assembly Kit ）

D.转化 0 GBclonart无缝组装 1. 从-80 C取出一支含有100μl的感受态细胞的管子，冰上溶化。将5μl反应液加入至100μl感受态细胞中，冰上继续放置5分钟。（GBclonartSeamlessAssembly Kit） 0 2. 42 C水浴1分钟，然后返回冰上放置2分钟。 0 GBclonart无缝组装试剂盒提供了一种新颖、高效、快速的基因组装方法， 3. 加入400μl不含抗生素的LB或SOC， 37 C震荡培养60分钟左右。 0 4. 将上述200 感受态细胞均匀铺在含有抗生素的LB盘子上，37 C温箱过只需相邻的DNA首尾之间与载体两端具有大约15-25个同源碱基序列，就可 μl 以在载体的任意位点完成多个目标DNA 片段的克隆重组，不需要任何限制性夜。第二天，挑3--5个克隆进行检验。内切酶和连接酶。当DNA 片段较长不易扩增时，可将长片段分解为多个短片 GBclonart引物设计要点：段分别扩增，各片段首尾重叠大约 15-25bp，再利用本试剂盒连接成一个长片 GBclonart 基因组装的引物设计及目的DNA 片段的扩增与常规PCR 法大致相段。似，关键在于所设计的引物能够使相邻 PCR 片段之间，或 PCR 片段与载体的两端具有大约15-25bp 的同源碱基。货号名称规格包装保存 1. 根据线性化载体末端的不同类型进行引物设计： GB2002-12 GBclonart无缝组装 12反应 120 μl -20℃ GB2002-24 GBclonart无缝组装 24反应 240 μl -20℃ GB2002-48 GBclonart无缝组装 48反应 480 μl -20℃ 产品保存：-20℃保存，有效期一年，使用时请避免反复冻融。产品特点： 1. 灵活的克隆位点：任何载体的任意位置。 2. 快速简便：30分钟完成载体构建。 3. 精确：不会增加任何额外的程序。 4. 效率高：高达90%阳性克隆率。 2. 连接相邻的DNA 片段时所使用的引物设计：在连接两个相邻的DNA 片段时，所需