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ICAM-1在大鼠STZ糖尿病性白内障中表达的实验研究.pdf
ICAM-1在大鼠STZ糖尿病性白内障中表达的实验研究
ICAM一1在大鼠STZ糖尿病I生白内障中表达
的实验研究术
福建医科大学附属第一医院 王晓辉 潘永明 徐国兴
[摘要】 目的:观察糖尿病性白内障晶状体上皮细胞转化生长因子B-1(TGF-B.)、细胞间粘附分子-1(ICAM-!)和I一胶原 (o0L.
I)的表达,用以研究Ic^I卜{在糖性白内障发病机制中的作用。方法:12O只sD大鼠随机分为两组,在糖尿病组中,一次性腹腔注
射STZ建立糖尿病模型{用免疫组化sP法分别于2、4、8周末观察糖尿病性白内障晶状体上皮细胞中ICAM-1、TGF-B.和C0L—I表达
变化及其相关性。结果:在糖性白内障组晶状体上皮细胞中I CAM一1、TGF—B t和c0L—I的表达明显增高,与对照组比较差异有统计学
意义,且TGF-B.与 ICAM-1和 C0L—I之间的表达表现出明显的正相关关系。结论:在糖性白内障组晶状体上皮细胞中ICAN--1的表达
明显增高,TGF— t可以促进晶状体上皮细胞ICAM-1和COL-I的表达,Ic^M一1通过介导细胞与细胞问、细胞与细胞外基质粘附,促进
HLEC的粘附、增生和移行,从而在糖性白内障中发挥重要作用。
[关键词】 细胞问粘附分子一1 糖尿病性白内障 晶状体上皮细胞 转化生长因子B一1 I一胶原
粘附分子是一类介导细胞问或细胞与细胞外基质问粘附作用 缓冲液临时配置),三天后采大鼠尾静脉血测血糖浓度,血糖浓度
的膜表面糖蛋白,在糖性白内障的发生过程中,TGF.p 在诱导晶 在16.7mmol/L以下的则不能视为糖尿病的大鼠。正常组仅给予腹
状体上皮细胞表达I型胶原的同时.也诱导1CAM.1的表达增强, 腔注射PH4.5,0.1mol/L的柠檬酸缓冲液。
通过 ICAM.I介导细胞与细胞问、细胞与细胞外基质l 的粘附, 1.2.2 检测指标和方法:从腹腔注射STZ开始,用裂隙灯检
诱导细胞发生斑片样多层生长,导致自内障的形成。我们于 查晶状体变化 (每刷1次)并监测血糖 (每两周一次)。
2005.2006年通过建立链脲佐菌素大鼠糖尿病性白内障模型,检测 分别于实验开始后2周末、4周末及8周末,白内障组和正常
晶状体上皮细胞 (LECs)中ICAM.1、TOF-pl及COL.I的表达的 组大鼠各取2O只(40只跟),测血糖,称重,取眼球。取出的眼
变化规律,研究ICAM.1在糖尿病性白内障发生、发展中的作用。 球立即用10%中性福尔马林液固定,制成0.4urn厚的石蜡切片。
现将结果报告如下。 1.2.3免疫组织化学染色 sP法检测 ICAM.1、TGF.Bl和
{ 材料和方法 COL.I表达,免疫组化实验步骤按Ultra Sensitive SP超敏试剂盒
1.1实验材料 免疫组化染色步骤进行。
1.1.1实验动物:SD大鼠(福建医科大学实验动物中心,许 1.2.4 数据分析及统汁学处理
可证号:2002.0006)。 ICAM.1主要表达于细胞膜上,阳性反应为棕黄色颗粒。
1.1.2实验试剂 TGF.13。和COL.I主要表达于细胞浆,阳性反应为棕黄色颗粒。在
链脲佐菌素(Sigma公司),小鼠抗大鼠ICAM.1抗体、免抗 光镜下随机选择观察5O个晶状体上皮细胞,用阳性细胞数占细胞
大鼠TGF.BI抗体、兔抗大鼠COL.I抗体(武汉博士德公司),sP 总数的百分比来表示阳性表达率。采用两因素的方差分析、直线
免疫组化超敏试剂盒(福州迈新生物公司)。 相关分析,以PO.05作为差别有显著意义的检验标准,所有统计
1.1-3主要仪器 均在SPSS1 1.0软件上运行。
OLMPUS数码相机 (C3040.ABU)、OLMPUS光学显微镜 2 结果
(BH-2)、onetouchI
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