荧光假单胞菌m18 的rpos 基因克隆及其功能分析.pdfVIP

卷 期 !! 微 生 物 学 报 ’( )!! .’ ) 年 月 #$$! % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,- #$$! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 荧光假单胞菌!# 的’. (, 基因克隆及其功能分析 徐汪节 朱栋华 张雪洪 许煜泉 （上海交通大学生命科学技术学院 上海 #$$#!$ ） @ 摘 要：从荧光假单胞菌（ ） 基因组中克隆了 聚合酶的稳定期 因子编码基因 !#$%’() * +$,#-#(. @G ) H/2 I.1 ! ，推测其氨基酸序列与铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的同源性分别为 、 和 ,/0 EE J /K 24 J6 K 24 J2K 。利用体外定点插入突变和同源重组技术，构建了H/2 的,/0 突变株H/2IF 。对突变株H/2IF 合成抗生 素吩嗪 羧酸（ ）和藤黄绿菌素（ ）的动力学分析结果表明，在 或 培养基中，突变株合成 的能力比 3/3 LM1 L(B N0 LLH LM1 野生型分别提高了 或 倍，但 的积累量不受影响。与野生型相比，突变株对碳源饥饿的耐性下降。同时， #6 6 J42 L(B 在碳源饥饿条件下对过氧化氢、乙醇和和氯化钠等环境胁迫的交叉保护性减小，存活率显著降低。 关键词：荧光假单胞菌 ， 突变株，吩嗪 羧酸，藤黄绿菌素，环境胁迫 H/2 ,/0 3/3 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） O426 1 $$$/3%#$E #$$! $3$$E3$% 在细菌中， 聚合酶的核心酶只执行转录延 菌株能同时产生两种不同类型的抗生素：吩嗪 羧 I.1 3/3 伸和终止功能。核心酶结合各种不同的 因子，识 酸（ ，吩嗪类抗生素）和藤黄绿菌素（ ，聚酮类 ! LM1 L(B 别专一性的特定启动子并起始转录，实现基因的区 抗生素），在迄今为止的国内外文献报道中， 是