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聚乙二醇沉淀联用双水相萃取法纯化蛋清溶菌酶的研究 - 生物技术通报
生物技术通报
·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2017, 33 5 :89-93
聚乙二醇沉淀联用双水相萃取法纯化蛋清溶菌酶的研究
闻崇炜 赵烨清 石莉 欧阳臻
(江苏大学药学院,镇江 212013)
摘 要 : 研究以聚乙二醇 (Polyethylene Glycol,PEG)沉淀法联用PEG- 硫酸铵双水相萃取体系纯化蛋清溶菌酶的工艺。结
果表明,向预处理的鸡蛋清液中加PEG 4000 至质量分数为16% 时,可选择性沉淀除去蛋清中98.1% 的杂蛋白,随后向上清液中
加硫酸铵溶液至其质量分数为4.32%, 可以构建PEG- 硫酸铵双水相体系,分离上相即得高纯度溶菌酶。该法所得产物中96.34%
为溶菌酶,其余为PEG 4000,不含有其它杂蛋白,溶菌酶总回收率达70.2%, 比活为25 000 U/mg。该法简便易行,易于放大,每
毫克精制溶菌酶中仅残留36.6 μg PEG 4000,生物安全性较高。
关键词 : 聚乙二醇4000 ;沉淀法 ;双水相法 ;溶菌酶
DOI :10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.05.013
Purification of Lysozyme from Egg White by Combination of
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Polyethylene Glycol Precipitation and Aqueous Two phase Extraction
WEN Chong-wei ZHAO Ye-qing SHI Li OUYANG Zhen
(School of Pharmacy ,Jiangsu University ,Zhenjiang 212013 )
Abstract: This work aims to establish a new technology of purifying lysozyme from egg white based on the combination of polyethylene
glycol(PEG)precipitation and aqueous two-phase extraction. The results showed that 98.1% of non-lysozyme proteins were removed by
the precipitation when PEG 4000 was added into pretreated egg white until its mass fraction reached 16%. Then,the supernatant of PEG
precipitation was collected and mixed with saturated(NH )SO solution until the mass fraction of this salt reached 4.32%. Therefore,the
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aqueous two-phase system of PEG/(NH )SO was established and most of lysozyme could be transferred into the top phase. It was found
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that 96.34%
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