li基因工程的补充.ppt

基因枪法 基因枪法： 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡，然后用基因枪将这些粒子(重组DNA)打入细胞、组织或器官中. 具有一次处理多个细胞的优点，但转化效率较低，另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备，并已取得初步成效。 花粉管通道法 花粉管通道法：在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。 该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出，我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握。 2．（2009年浙江卷）下列关于基因工程的叙述，错误 的是　　 ( 　 ) A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工 具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无 生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞 和促进目的基因的表达 * 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中通过克隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因 基因文库 基因组文库: 部分基因文库(cDNA文库): 含有一种生物的所有基因的基因文库 含有一种生物的部分基因的基因文库 （2）比较基因、基因文库、目的基因的区别 基因：有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状 的遗传物质的基本结构和功能单位 目的基因：是基因工程操作中需要的外源基因 基因组DNA文库的构建 将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因组片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因组文库。 mRNA 逆转录 cDNA (互补DNA） 第二条DNA链 （2）以mRNA为模板，反转录合成互补的DNA片段，建立cDNA文库(部分基因文库)； 利用PCR技术扩增目的基因 聚合酶链式反应，在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。可以获得大量的目的基因。 将目的基因导入到动物的受精卵里，目的基因若与受精卵染色体DNA整合，细胞分裂时，该基因随染色体的倍增而倍增，使每个细胞中都带有目的基因，使性状得以表达，并稳定地遗传给后代，从而获得基因产品。这样一种新的个体，称为转基因动物。 什么叫转基因动物？ 将目的基因导入植物细胞 ?农杆菌转化（介导）法 T-DNA: Transferring DNA 原理：Ti质粒来自于土壤的农杆菌，能感染植物形成瘤。Ti质粒能成功转入植物细胞，并将质粒的一部分DNA整合到植物基因组上。 因此，人们可以将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助于农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移和整合，然后通过植物组织培养技术，再生产转基因植株。 2.将目的基因导入动物细胞 显微注射技术 提纯基因表达载体 体外显微注射入受精卵 受精卵移植 1.将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 2.将目的基因导入动物细胞 显微注射技术（最多、最有效） 3.将目的基因导入微生物细胞(如大肠杆菌) Ca2+处理，以增加细菌细胞壁的通透性。 1）有关基因工程的叙述中，错误的是 A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性核酸内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、一种限制酶只能识别一种特定的脱氧苷酸 序列 A 练习 2）有关基因工程的叙述正确的是 A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供 　　　资料 D 3）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C 1．（全国卷）采用基因工程的方法培育抗虫棉， 　下列导入目的基因的作法正确的是 　（ 　） 　①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 　②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵 中 　③将编码