PAD培养基的制作教案.docVIP

PAD培养基的制作教案 课 题 PDA培养基的制作 课 型 技能课 授课日期 2004-12 授课时数 1课时 教学目标 1、掌握常用母种培养基的制作过程 2、学会操作使用高压灭菌锅 教学重点 PDA培养基的制作过程 教学难点 高压灭菌锅的操作使用及注意事项 教学方法 讲授法、演示法、观察法、讨论法、练习法 教具准备 多媒体课件、高压灭菌锅、试管、棉塞等。 板书设计 §4、部分电路欧姆定律 一、欧姆定律 二、伏安特性曲线 §5、电能和电功率 电能 电功率 焦耳定律 教学程序 教 学 过 程 师生活动及设计 Ⅰ 引言 同学们，上节课我们已经学习了食用菌菌种培育的一些基本知识，那么我们先回顾一下下面的几个问题。 菌种培养的一般设备有哪些？ 灭菌锅 接种箱 培养室 恒温箱 天平 试管 量筒 接种工具 漏斗 棉花、纱布 酒精灯 菌种瓶 电冰箱 进行灭菌、接种最主要的两个设备是什么？ 高压灭菌锅 接种箱 培养基配制应遵循哪些原则？ 选择适宜的营养物质。 注意各成份的比例。 调节适宜的pH值。 选择经济实用材料。 [讲授新课] PDA培养基的制作 [过渡语] 母种培养基的种类很多，但它们的配制过程基本上相同，下面我们介绍分离菌种、培育母种最常用的马铃薯——萄葡糖——琼脂培养基（简称PDA培养基）的制作过程 工艺流程 计算——称量——配制——趁热分装——塞棉塞——包扎成捆——灭菌——摆斜面——无菌测定 操作步骤 PDA培养基配方： 马铃薯（去皮）200g 葡萄糖 20g 琼脂 18——20g 水 1000ml pH值 5.5——6 计算：根据制作培养基需要量，依据配方计算各物质所需要量。 称取：用天平、量杯等准确称量各物质。 配制：加热浸提——过滤取汁——添加琼脂——加热溶化——添加糖分——测pH值 注意事项：（1）加热搅拌、以防溢出和焦底（2）测定并调pH值（5%稀HCL或5%NaOH溶液） 趁热分装 注意事项：（1）一定要趁热分装，以免冷凝（2）勿使培养基沾附试管口（3）容量：试管中1/5 塞棉塞 注意事项：制作棉塞要用质量较好的普通棉花，要求棉塞底部要平、侧面要直、成圆柱状、长4——5厘米、松紧要适中。塞入管内部分为棉塞长度的2/3。 6、包扎成捆 注意事项：7——10支捆成一束，牛皮纸或油纸将棉塞部分包扎好（以免灭菌过程中棉塞变湿）。 灭菌 介绍手提式高压灭菌锅操作步骤及注意事项 步骤 注意事项 加水 至水位线、过少易烧干、过 多易受潮 （2）装锅 不宜太挤，否则影响蒸汽流通和灭菌时间 （3）关严锅盖 均匀拧紧螺旋，勿漏气，关闭气阀 （4）点火加热 （5）排放冷空气 压力升至0.5kg/cm2时，排空气一次 （6）升压与保压 压力达1.1kg/ cm2时,控制热源，保持压力不变，计时30分 （7）降压与排气 停火,自然冷却或排气降压,不能太快以防冲掉棉塞或瓶子爆裂脱底 （8）出锅 不要马上揭去锅盖,借余热烘干棉塞 摆成斜面： 注意事项：趁热逐支斜放在有凹槽的小木条上，使之冷却成斜面，斜面总长度不超过试管长度的1/2 无菌测定： 注意事项：灭菌后的斜面培养基，要进行无菌测定，从中取2——3支，放入300C左右的恒温箱中，培养3天，表面如仍光滑，无杂菌出现，就可供接种。 [练习] 结合书本及刚才所讲的，做下边练习题。 手提式高压灭菌锅操作步骤及注意事项： 操作步骤 注意事项 加水 装锅 关严锅盖 点火加热 排放冷空气 升压与保压 降压与排气 出锅 [小结] 今天，我们学习了最常用的母种培养基（PDA培养基）的制作方法，首先，对制作过程应该有个清楚的了解，其次对手提式高压灭菌锅的操作步骤及注意事项也应该在头脑中反映出来，那么，下一节，通过我们在实验室进行操作实习，在经过实习之后，我们会有更深的理解和掌握。 [作业] 书后练习题 在课余时间阅读高压灭菌锅操作使用有关内容，进行棉塞制作练习，为PDA培养基制作实习作准备。 教学程序 教学内容 教学方法与 教学手段 Ⅱ Ⅲ 课堂思考 1．图（a）中 I=______, UR=___