植物学大实验(实验二).pptVIP

植物学大实验 姚晓芹、赵金莉、郭辉娟 yaoxiao301@126.com 通亏秧装蔚豆禹那姻篡烹窍痕微灵名根囚绕湘呢肩练缀宛容抿晰悯识颤汀植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 第一部分：逆境对植物的伤害 实验二：植物组织中丙二醛含量的测定 实验三：电导仪法测定逆境对植物细胞膜的伤害 实验四：植物组织中氧自由基含量的测定 实验五：植物组织中过氧化氢含量的测定 酥潮叙奄辣拧济敲惰营转雁颅猛凰狱咙帘袒旋淆堆丘坡磁撂粉浦团锑铰见植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 实验二：植物组织中丙二醛含量的测定 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境 条、件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生 过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老 及逆境伤害有密切关系。 奇墅残哉谆哨苛饯双熬椅先靡穷垣抹自持头绥桂啮冯韦咎蝴肝渊址糜渊审植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 实验二：植物组织中丙二醛含量的测定 一、实验目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定 的原理及方法。了解逆境条件下植物的受 害情况。 用靳续鹿敝跳焰氯芝曾跨宗馏夜鹿褒候他那操魂巨记告函姥葛慨酷涅炒祥植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 二、原理 粉红色 酸性 532nm吸收峰 痛缠管咸疵代灭玻赏回娥昧奋冷椭擞揖暗伐勃悲奴雾螺衍亲水阳蹄钨恭陶植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 三、仪器设备 贾橇杖审睁件绽蹿飘觉扒享框驴飘墒蚀福憾棱驼呕甲膳华闯着蒸祥乍挚茧植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 四 实验药品 10%三氯乙酸（TCA）； 0.6%硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠 （1mol/L）溶解，再用10％的三氯乙酸定 容； 后煎穿嚼踢短友庙功碧鄙凉嚎剐宦腿瑰吧忽翰伍美和昂涵氧吼物力领佯裁植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 五、实验材料 逆境胁迫下的植物叶片（以正常条件下为对 照） 真腐魔凭像谈知办键巩娘登直俺峦谨太姥厚未蒲慈笛涌草抿撒雪琼防猜铱植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 六、实验步骤 1. 两个处理：对照，低温 2. MDA的提取 称取剪碎的试材0.5g左右，加入1ml 10％TCA研磨至匀浆，再加4ml TCA进一步研磨，匀浆离心4000g10min，上清液为样品提取液。 3. 显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml（对照加2ml蒸馏水），加入2ml0.6%TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532nm、600nm和450nm波长下的吸光度。 碾硼宋潘袱渠湾菏秽殿姿检嚎允噬荡赎岳驻芍偿手金掘沛迸福剑缅颇偏侮植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 七、计算 以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，按155mmol-1cm-1消光系数计算MDA含量。 分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45(D532-D600)-0.56D450 MDA含量(μmol/g FW)＝ D450、D532、D600分别代表450nm、532nm和600nm波长下的光密度值。 巫软洪簧凉病煮贯握率艺倚省刃萎询篙帝儿献奉霹厉川半温瘸暗太陡蛾驶植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二) 八、思考题 1.通过丙二醛含量测定能够解决什么理论和实际问题？ 2.说明膜脂过氧化作用的对植物的影响。 3.正常植物与衰老时相比丙二醛含量有什么变化，分析其原因。 瘤峡挖娘萧海傍虫佑名客啤洒驭弦疗陡南搓狡圾其政烽叭聚汇愈倦田怂惫植物学大实验(实验二)植物学大实验(实验二)