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第四章微生物的营养和培养基_微生物学

1.基础培养基(minimum media) 在一定条件下含有某类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,也称为基本培养基。 2.加富培养基(enriched media) 在普通培养基(如肉汤蛋白胨培养基)中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物。 Eg. 培养百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis)需要含有血液的加富培养基。 这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。 根据待分离微生物的特点设计的培养基,用于从环境中富集和分离某种微生物。 (目的微生物在这种培养基中较其他微生物生长速度快,并逐渐富集而占优势,从而容易达到分离该种微生物的目的。) 3.增殖培养基(complete media) 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其他微生物,这种培养基称为增殖培养基。常用于菌种筛选。 Eg. 要分离出能利用石蜡油进行发酵的酵母菌,只需在配方里使用石蜡油作碳源。 4.选择性培养基(selected media) 一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。 选择性培养基是19世纪荷兰的M. W. Beijerinck和俄国的S. N. Vinogradsky发明的。 例如,在培养基中加入链霉素、氯霉素可以抑制原核微生物的生长,这种培养基用于分离真菌。 (1)利用该分离对象对某种营养物有一特殊“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物,把它制成一种加富性选择培养基(enriched selected media),采用了这类“投其所好”的策略,就可使原先极少量的筛选对象很快在数量上接近或超过原试样中其他占优势的微生物,从而达到了富集或增殖(enrichment)的目的。 作为加富的营养物主要是一些特殊的碳源或氮源, 例如,甘露醇可富集自生固氮菌; 纤维素可富集纤维分解菌; 石蜡油可富集分解石油的微生物; 较浓的糖液可富集酵母菌。 (2)利用该分离对象对某种抑菌物质所特有的抗性,在筛选培养基中加入这种抑菌物质,经培养后,使原有试样中对此抑制剂表现敏感的优势菌生长大受抑制,原先处于劣势的分离对象大量增殖,最终在数量上占优势。通过这种“取其所抗”的办法也可达到富集培养的目的。这种培养基称为抑制性选择培养基(inhibited selected media)。 用作抑制它种微生物的选择性抑菌剂有染料(结晶紫等)、抗生素、脱氧胆酸钠和叠氮化钠等。 用于选择性的其他理化因素还有温度、氧、pH和渗透压等。 在实际应用中,所设计的选择性培养基几乎都同时利用了以上的“投其所好”和“取其所抗”两种功能,可充分提高其选择效率。 5.鉴别性培养基(differential media) 一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。 用于鉴别不同类型微生物的培养基特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。 最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基,即EMB(Eosin Methylene Blue)培养基。 它在饮用水、牛奶的大肠菌群(coliforms)数等细菌学检查和在 E. coli 的遗传学研究工作中有着重要的用途。 EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G—细菌。 在低酸度时,这二种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。 试样中的多种肠道菌会在EMB培养基上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落,因而易于辨。 例如 E. coli 强烈分解乳糖而产生大量的混合酸, 菌体呈酸性,菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光(似金龟子色)。 4. 培养基的种类 天然培养基、组合培养基和半组合培养基; 液体培养基、半固体培养基和固体培养基; 基础培养基、加富培养基、增殖培养基、 选择性培养基和鉴别培养基; 种子培养基、发酵培养基和保种培养基。 复习思考题 设计一张表格,比较一下微生物6类营养要素。 2. 设计表格,比较微生物的4大营养类型。 3. 设计表格,比较四种营养物质进入细胞的方式。 4. 对培养基的种类列表表示。 是指寄生或共生的微生物, Eg.类支原体(MLO)、类立克次氏体(RLO)和少数寄生真菌等。 难养菌(fastidious microorganisms) 碳氮比(C/N)比: 碳源

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