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植物离体无性繁殖(包含脱毒)
植物离体无性繁殖(propagation in vitro)
植物离体无性繁殖
思 考 题
一、名词解释
1.植物快繁 2. 丛生芽 3. 原球茎 4.驯化
5.玻璃化现象 6. 褐化现象 7. 黄化现象
8.无性系 9.无性系变异
二、问答题
1.简述植物快繁器官形成的5种方式及其特点?
2.简述植物快繁的程序?
3.试管苗移栽的步骤?
植物离体无性繁殖
含义:利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法,也称植物快繁或微繁。
特点:繁殖率高;培养条件可控性强;占用空间小;时间短;管理方便;便于种质保存和交换。
植物离体无性繁殖
植物快速繁殖技术
60年代,法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功。70年代得到了快速的发展。通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科、1000种以上。
美国、法国、意大利、荷兰等欧美国家试管苗的年产量均在数千万株以上,并且以每年7%-8%的速度增加。
我国快速繁殖和无病毒种苗生产的研究始于70年代马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植。花卉、果树。
植物离体无性繁殖
第一节 植物快繁的器官形成方式
第二节 植物快繁的程序
第三节 影响植物快繁的因素
第四节 植物快繁的技术问题
植物离体无性繁殖
第一节 植物快繁的器官形成方式
植物快繁的器官再生方式分为:
一、短枝发生型
二、丛生芽发生型
三、不定芽发生型
四、胚状体发生型
五、原球茎发生型
植物离体无性繁殖
一、短枝发生型
外植体携带的带叶茎段,在适宜的培养环境下萌发,形成完整植株,再将其剪成带叶茎段,继代成苗的繁殖方法。与田间的扦插方法相似,也称微繁扦插。
优点:一次成苗,遗传性状稳定,培养过程简单,移栽成活率高。
应用:花卉和葡萄试管苗的繁殖。
植物离体无性繁殖
二、丛生芽发生型
外植体携带的顶芽或腋芽,在适宜的培养环境中不断发生腋芽而呈丛生芽状态,将单个芽转入生根培养基中,诱导生根成苗的繁殖方法。
丛生芽:定芽的萌动,形成微型的多枝多芽的小灌木丛状结构。如顶芽切取尖端,可产生无病毒植株。
优点:不经过愈伤组织,保持性状好。
应用:大多数植物试管苗的繁殖。
植株
植物离体无性繁殖
三、不定芽发生型
外植体在适宜的培养环境中,经历两种途径:
a.经过脱分化形成愈伤组织,然后经过再分化产生不定芽-----器官发生型
b.外植体不形成愈伤组织而直接从其表面形成不定芽----器官型
将芽苗转入生根培养基中,诱导生根成苗的繁殖方法。
特点:增殖率高于丛生芽,但有变异发生。
应用:也是大多数植物试管苗的繁殖方式。
植物离体无性繁殖
四、胚状体发生型
外植体在适宜的培养环境中,经过诱导产生体细胞胚的繁殖方法。
特点:不经过生根培养,直接形成小植株。成苗数量大,速度快,结构完整
植物离体无性繁殖
五、原球茎发生型
茎尖或腋芽外植体诱导成原球茎,切割原球茎进行增殖,或停止切割使其继续培养转绿,产生毛状假根的繁殖方法。
原球茎:短缩的、珠粒状的、胚性细胞、类似幼茎的器官,可增殖、形成原球茎丛。
应用:兰科植物快繁。
植物离体无性繁殖
第二节 植物快繁的程序
阶段Ⅰ:无菌培养物的建立
阶段Ⅱ:繁殖体增殖
阶段Ⅲ:芽苗生根
阶段Ⅳ:小植株的移栽驯化
植物离体无性繁殖
阶段Ⅰ:无菌培养的建立
(一)母株(stock plant )和外植体的选取:
木本、较大草本:带芽茎段、顶芽或腋芽
矮小草本:叶片、叶柄、花瓣
(二)无菌培养物的获得
(三)外植体的启动生长
a. 腋芽受刺激后生长;
b. 外植体伤口处产生不定芽
c. 外植体切口表面产生愈伤组织
植物离体无性繁殖
阶段Ⅱ:繁殖体增殖
(一)培养材料的增殖方式
以芽繁殖的方式;
原球茎增殖
(二)增殖培养基
基本培养基与阶段1相同,分裂素和矿物质含量提高
(三)增殖体的大小和切割方法
原则:取最小组织块(带一个茎节)
植物离体无性繁殖
阶段Ⅲ:芽苗生根
(一)离体生根(试管内生根)
(二)活体生根(试管外生根,如同插条生根)
阶段Ⅳ:小植株的移栽驯化
(一)移栽
(二)驯化管理
植物离体无性繁殖
第三节 影响植物快繁的因素
一、 外植体
二、 培养基
三、 培养条件
四、 继代培养
五、 移栽
植物离体无性繁殖
一、外植体
外植体的来源
茎尖、带芽茎段、叶片、根段、花器、子房、子叶
外植体生理年龄
外植体大小
茎尖:0.2-0.3mm;
叶片、花瓣:5mm
茎段: 0.5cm
植物离体无性繁殖
二、培养基
基本培养基:MS、白糖
植物生长调节剂:
高浓度的细胞分裂素和低浓度的生长素促进
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