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实验三双重染色与永久装片的制作重点讲义
实验三 双重染色与永久 装片的制作 授课教师：郑磊 2008.12.10 实验目的 学习并掌握植物制片的双重染色法 掌握徒手切片制成永久装片的方法 实验原理 番红-固绿对染法，是植物制片中最普遍的一种二重染色法，其染色程序简单并能清晰地显示出细胞结构。 番红为碱性染料，能将木质化、角质化、栓质化的细胞壁，以及细胞核中的染色质、染色体和花粉外壁等染成红色； 固绿为酸性染料，能使细胞质及纤维素的细胞壁染成绿色。 实验用具 显微镜、载玻片、盖玻片、单面刀片、双面刀片、培养皿、毛笔、滴瓶、胶头滴管、滤纸 实验材料与试剂 实验材料 吊兰茎、蒜苔 试剂 1%番红水溶液、1%固绿酒精溶液 实验方法 徒手切片 将材料切成薄而透明的切片，镜检以选择较理想的薄片。 染色 将选好的切片置于载玻片中央，加一滴1%番红水溶液，染色15~20min，用滤纸吸去染液，再滴蒸馏水洗去浮色。 脱水 依次滴少许30% 50% 70% 85% 95%各等级酒精各10~15s进行脱水，每滴一滴酒精后用滤纸吸去。 复染 吸去95%酒精后，加一滴1%固绿酒精溶液，复染5~10s，再滴加95%酒精去浮色。 实验方法 透明 吸去95%酒精，滴加无水酒精，然后经1/2无水酒精+1/2二甲苯 二甲苯（两次）每次2~3s，使材料完全透明。透明后保持二甲苯不挥发，盖好盖片，镜检。 制成永久装片 掀开盖片，滴一滴中性树胶，再加盖片封片，然后置于30~35℃恒温箱中烘干。 实验方法 作业 制作一张合格的双重染色切片，要求薄（一层细胞）、平整、透明，染色红绿分明。 简述番红-固绿双重染色的染色原理。 * * LOGO 叶的横切 玉米茎横切 南瓜茎横切 南瓜茎纵切 * * *
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