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牛膝提取物神经再生素促小鼠坐骨神经再生的实验研究论文.doc
牛膝提取物神经再生素促小鼠坐骨神经再生的实验研究论文
【摘要】 目的观察中药牛膝提取物神经再生素(NRF)对小鼠损伤坐骨神经的修复作用。方法ICR小鼠50只,雌雄各半,行坐骨神经夹伤术,随机分成5组:NRF高、中、低剂量组,弥可保组(阳性对照),生理盐水组(空白对照)。术后每日腹腔注射给药。采用小鼠坐骨神经功能指数(sciatic function index, SFI)、组织形态学及电镜检查,观察NRF对损伤坐骨神经的影响。结果与空白对照组相比,NRF可显著改善小鼠的坐骨神经功能。超微结构观察表明.freel Achyranthes bidentata Blume (BL) on the crushed sciatic nerve of mouse. MethodsFifty ICR mice suffered from the sciatic nerves crush ent. The animals ly divided into five groups: three NRF groups (loiddle and high dose), Mecobalamin group (positive control) and blank control group. These mice after sciatic nerves crush received NRF by intraperitoneal injection every day. Sciatic function index (SFI) orphology and ultra-structure ius muscle ber of regeneration nerve fibers, thick and degree of maturity of regeneration myelinated nerve sheath in NRF groups ore than those in the blank control group. ConclusionNRF can promote the regeneration of peripheral nerve and improve the recovery of function.
Key e (BL); Nerve regeneration factor; Sciatic nerve injury; Nerve regeneration
神经再生素(nerve regeneration factor, NRF)是从中药怀牛膝中提取的有效组分(中国专利申请号:200710019780.4),主要成分为甾酮、多糖、多肽等。已有的研究资料显示,神经再生素具有促进神经元生长、防止神经元凋亡的作用[1~6]。本实验采用小鼠坐骨神经损伤模型,观察NRF对周围神经损伤的修复作用,进一步探讨其药理作用。
1 材料与方法
1.1 动物和试剂 健康成年ICR小鼠50只(由南通大学动物中心提供),体重(20±2)g,雌雄各半,随机分成5组。NRF由南通大学神经再生重点实验室提供(批号:060213),注射用生理盐水溶解至适当浓度备用。弥可保注射液:日本卫材株式会社制造(批号:050665)。
1.2 模型制备 复合麻醉剂(0.03 ml/10 g)作腹腔麻醉,左臀部作1 cm切口,在距梨状肌下缘0.3 cm处以特制钳子,钳夹坐骨神经3次,10 s/次,间隙10 s,挤压损伤的宽度为2 mm。损伤远端以8-0显微缝线在神经外膜上作标记,缝合切口。术后每天腹腔注射给药:NRF高、中、低剂量组(0.16,0.08,0.04 mg/10 g体重),弥可保组(1.3 μg/10 g体重,按体表面积折算相当于临床人推荐剂量),空白对照组(给予等体积生理盐水)。
1.3 一般情况观察 术后每天观察小鼠伤口愈合情况、步态变化及整体状态。
1.4 坐骨神经功能指数(sciatic nerve index, SFI)测定 术后8,12,16,20 d分别行足迹实验。小鼠双侧后足蘸红色印泥行走后每侧足留下8~10个足印,测量足印长度(print length,PL)、足趾宽度(toe spread,TS)、中间足趾宽度(intermediary toe spread,IT),将上述3个变量代入Bain公式计算出坐骨神经功能指数(sciatic function index, SFI):SFI=-38.3(EPL-NPL)/NPL+109.5(ETS-NTS)/NTS+13.3(EIT-NIT)/NIT-8.8。公式中各变量前E代表术侧,N代表健侧。SFI以0为正常值,-100为神经完全断离的指标[7]。
1.5 腓肠肌肌细胞截面积
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