流式细胞仪小结.docVIP

流式细胞仪技术及专利研究新进展 (高金湖 无锡荣兴科技有限公司生物化学部) 流式细胞术（Flow Cytometer, FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。 流式细胞仪主要由细胞流动室、激光聚焦区、检测系统、数据处理系统等4 部分组成，其工作原理是将被检测对象如细胞等制备成一定浓度的分散的细胞悬液，经特异性荧光染料染色后放入流式细胞仪的样品管中，细胞在气体的压力下进入流动室、流动室由样品管和鞘液管组成，在鞘液的约束下，细胞排列成单列从流动室的喷嘴高速喷出成为细胞液粒，经特异性荧光染色后的细胞经过激光检测区时受激光激发，产生散射光和荧光信号，通过一些波长选择通透性滤光片，可以将不同波长的散射光和荧光信号区分开来，散射光是从细胞表面或细胞内颗粒散射出来的原激光光谱，其信号比较强，用光敏二级管即可检测。荧光信号较弱，需用光电倍增管接收并放大，散射光和荧光信号接收后经转换成电信号，这些信号经过加工处理储存于计算机中，用专门的计算机软件对其储存的数据进行图像处理，可在计算机上直观地统计出各种染上荧光染料的细胞的百分率，选择不同的单克隆抗体及荧光染料，可同时测定一个细胞上的多种不同的特征如细胞大小、DNA 含量、细胞表面抗源表达、癌基因蛋白等等。 市场上销售的流式细胞仪产品种类很多，主要生产厂家有：BD、Beckman-Coulter、Partec、Accuri Cytometers、Guava、Union Biometrica、Amnis等，比较熟悉的还是BD和Beckman Coulter。各个公司仪器的用法会有所不同，但原理是完全一致的。 BDFACs(fluorescence activated cell sorter)，即荧光激活细胞分选器。其型号种类比较齐全，如早期的FAC．Sort、FACS Canto、FACScan。现在市场上供应的型号有五种：FACSCount(小型流式细胞仪)、FACSCalibur(流式细胞仪)、FACSAria(流式细胞分选仪)、FACSVantage SE(多色分析和高速分选流式细胞仪)、LSRII(数字化分析型流式细胞仪)。Beckman公司的流式细胞仪的型号有：EPICS XL/XL-MCLFC500, CyAn ADP等。FACSCalibur. BD FACSCalibur 流式细胞仪是第一台全自动四色流式系统兼具分析和分选双相功能的台式机，偏重于临床，其整体设计帮助临床医生快速实现常规免疫表型、CD4T细胞计数、DNA、网织红细胞、血小板等临床分析，兼具分选功能。配备有二根激光管，可同时检测4个荧光参数。可识别粘联细胞。开机无需等待，预热5分钟即可上机检测。 2．FACSAria BD FACSAria流式细胞分选仪为台式高速细胞分选仪，获取速度达70,000细胞/s，分析速度达50,000细胞/s。使用石英杯流动检测池固定光路校准技术。使用三种激光，多色分析，分析参数可达15色。两管或四管分选，可以使用多种规格的收集管。液流监测系统白动监测液流断点，检查堵塞，实现了细胞分选的无人操作。配件BDACDU装置，可以在微孔板或载波片上定量分选细胞。 3．FACSCanto BD FACSCanto 流式细胞仪是第一台六色分析的台式流式细胞仪，系统兼具流式细胞分析仪BDTMLSRⅡ和流式细胞分选仪BD FACSAriaTM上首次使用的许多高新技术；液流控制车的设计节省了时间，提高了效率。BD FACSCanto流式细胞仪适用于各种科研应用，尤其适用于对含量极少的细胞进行高速分析，而且样本间的交叉污染却极小。 FACSVantage FACSVantage具有最佳分析灵活性和高速度分选功能，可通过Autosort进行自动化分选。除常规应用外，还可进行高分辨率的染色体分析。FACSVantage SETM FACSVantage SETM是在FACSVantage的细胞分选功能基础上推出的分选增强型流式细胞仪。六色荧光分析系统，点对点分选，配置FACS Diva数字化系统，提供全面的配套试剂。速度和功能优于FACSVantage。 6．FACSAria III BD公司近日宣布推出新一代的流式细胞仪——BD FACSAria III细胞分选系统，它能够利用6根激光运行复杂的多色实验。自2003年首次推出BD FACSAria以来，这一系列仪器开创了细胞分选的复杂世界，让受众更多，应用范围更广。如今新上市的BD FACSAria III系统更加强大、可靠，且更易用。 BD FACSAria III细胞