脂质体研究进展学.doc

新型药物载体免疫脂质体的研究进展 08药剂3班 乔宇 20080702067免疫脂质体(immunoliposomes)是单克隆抗体(monoclonal antibody，mAb，简称“单抗”)或其片段修饰的脂质体的简称，这种新型药物载体对靶细胞具有分子水平上的识别能力，具有很多优势，包括对肿瘤靶细胞呈现明显的选择性杀伤作用，且杀伤活性比游离药物、非特异抗体脂质体、单独单抗等更强；在荷瘤动物体内呈特异性分布，肿瘤病灶药物浓度升高， 药物毒副作用较小；体内循环半衰期长及运载药物量大等。免疫脂质体发展至今经历了数代：第一代是抗体或抗体片断直接与脂质体的脂膜相连，但由于巨噬细胞的吞噬很快被血液清除； 第二代在第一代的表面引入了聚乙二醇(PEG)等亲水性大分子，延长了在血液中的循环时间，但PEG长链对单抗的屏蔽使抗体与靶细胞的结合能力降低；第三代将抗体连接在PEG或其衍生物的末端， 制成空问稳定性免疫脂质体(sterically stabilized immunoliposomes，SIL)，延长了包含药物的脂质体的血液循环时问，且单抗伸展至脂质体外部发挥寻靶作用。本文就免疫脂质体的分类、抗体连接脂质体的方法、临床应用及其发展现状进行综述。1 免疫脂质体的分类根据靶向特异性细胞和器官的原理可将免疫脂质体分为抗体介导和受体介导两类。1．1 抗体介导的免疫脂质体抗体介导的免疫脂质体是利用抗原一抗体特异性结合反应，将单抗与脂质体偶联。抗体有单克隆抗体和多克隆抗体之分，单抗因其专一性在抗体应用中占主导地位。现今，全世界已有超过1 50种单抗应用于临床或正处于临床研究阶段，且也已从原先的纯鼠单抗发展为人鼠嵌合抗体及人源化抗体，如已上市的人源化单抗Daclizumab、Palivizumab、Trastuzumab等； 临床应用中，单抗从最初治疗器官移植排斥反应、降凝血发展到治疗癌症、HIV感染等疑难性疾病[2】。1．1．1 两种抗体修饰的双靶向免疫脂质体靶向物用两种不同的抗体修饰脂质体，可增加其结合特异性和细胞摄取率，并且抗体在靶向细胞时能产生协同作用【3】。Laginha等【4]假设脂质体通过抗体靶向到两种或多种受体时， 由于受体密度增加，靶向效果会更好，并用荧光测定分析法验证了这一假设的正确性。这项实验中， 分别制备了连接相同密度抗体的aCD19靶向脂质体、etCD20靶向脂质体、两种脂质体混合物(混合比例为1：1)及双靶向脂质体，证实了双靶向脂质体和混合脂质体较单个抗体修饰的脂质体和受体有更大的结合率和摄取率，且出现加和性；细胞毒性实验中，装载有阿霉素的双靶向脂质体较这两种脂质体混合物有更高的细胞毒性。Saul等【5]以阿霉素为模型药物，用叶酸和抗表皮生长因子的单抗修饰脂质体， 同时靶向两种受体，使药物更多地聚集于肿瘤靶位，降低了对正常组织的毒性。1．1．2 抗体片段修饰的免疫脂质体虽然抗体对靶点具有高选择性， 但持续给药时， 患者往往会出现免疫反应， 特别是应用外源性抗体f如鼠)时免疫反应加剧。而抗体片段Fab。(55kDa)、单链抗体可变区基因片段scFv(35kDa)产生的免疫原性比整个单抗低，且更易控制其性质(如亲和力或被细胞摄取的能力)，故在临床试验中应用较多。如抗表皮生长因子受体(HER2)Fab’比应用整个抗体的免疫原性低，且在体内具有更好的药物代谢分布和更长的血液循环周期，更易渗透进入实 体肿瘤组织[6]。采用scFv作靶标修饰脂质体携带药物进入肿瘤细胞有着巨大的潜力，它与较大的外源性片段相联时能降低免疫原性，在提取和纯化方面的研究工作也在深入开展【7】。Shmeeda等『81将抗HER2的scFv修饰脂质体，分别制成大约每个脂质体结合有 7．5、l5、30个scFv，小鼠体内试验中，scFv一脂质体 和HER2表达的细胞的结合率是普通脂质体的2O倍， 且结合有15个配体的脂质体最优。Cheng和Allen[9】 比较了应用抗CDI9的整个单抗、Fab’片段、单链Fv结合的免疫脂质体包裹阿霉素，靶向B细胞CD19抗原，研究发现Fab’结合的免疫脂质体具有最长的循环半衰期。1．2 受体介导的免疫脂质体利用受体与配体结合的专一性，针对体内某些组织和器官中存在的特殊受体能选择性识别配体，将脂质体与配体共价结合，此类脂质体被称为受体介导的免疫脂质体。许多肿瘤细胞表面有些特殊受体过度表达， 比如叶酸受体、转铁蛋白受体、血管内皮生长因子(VEGF)受体、人表皮生长因子受体和一些细胞粘附分子等【．o】， 因此可以利用此类受体介导的细胞内摄作用将脂质体运送到癌细胞中。叶酸修饰的脂质体粒径大小对受体介导的内摄作用有重要影响，脂质体粒径小于60nm时更易被脑肿瘤细胞摄取【l11，因此将脂