个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质.PPT

典型的生长曲线 （Growth curve） 不同温度下的代时 E. Coli 在不同温度下的代时 温度（℃） 代时（分） 温度（℃） 代时（分） 10 860 35 22 15 120 37 17 20 90 40 17.5 25 40 45 20 30 29 47.5 77 营养物浓度与对数期生长速率和产量 作用方式：影响微生物的生长速率和总生长量 生长限制因子：凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物就称生长限制因子 2.厌氧的堆积培养法 大规模的固态培养的例子还不多。如白酒生产中的深层地窖发酵法 1.好氧菌的培养 （1）浅盘培养（shallow pan cultivation) (2)利用发酵罐作深层液体发酵 发酵罐（fermenter)是一种钢质圆筒形直立容器，发酵罐的主要作用是要为微生物提供丰富而均匀的养料，良好的通气和搅拌，适宜的温度和酸碱度，并能确保防止杂菌污染。有一套必要的附属装置，例如培养基配置系统，蒸汽灭菌系统。以及发酵产物的后处理系统。 （二）液体培养 2.厌氧菌大规模的液体培养装置 第三节 微生物生长繁殖的控制 一、几个基本概念 灭菌（sterilization） 采用强烈的理化因素是任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。 消毒（disinfection） 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施，称为消毒。 防腐（antisepsis） 利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施，称为防腐。 化疗（chemotheraphy） 即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病院微生物的生长繁殖，以达到治疗该传染病的一种措施。 1、高温灭菌（消毒）法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。 一、常用的灭菌、消毒、抑菌及除菌的物理方法 （一）温度 1、干热灭菌法（dry heat sterilization） 焚烧法（incineration）：是将被灭菌物品在火焰中燃烧，使所有的生物质碳化。简单、彻底，但对被灭菌物品的破坏极大。适用于无经济价值的物品灭菌，及不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。 干燥热空气灭菌法(hot-air oven)：将物品放入烘箱内，然后升温至150℃—170 ℃ ，维持1—2小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。 特点：由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。 特点：温度低、时间短、灭菌效果高 原因： 1) 菌体内含水量越高，则凝固温度越低； 2) 蒸汽冷凝会放出潜热； 3) 饱和水蒸汽穿透力强； 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定 性，主要破坏氢键结构。 2、湿热法(moist heat sterilization) ： 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。 方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15-20min。 112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20-30min。 115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。 高压蒸汽灭菌法 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 注意事项： 排净冷空气； 灭菌终了，缓慢降压； 灭菌结束，趁热取出物品。 连续加压蒸汽灭菌法－连消法 方法：135－140℃ 维持5－15s 优点：1.灭菌彻底，减少营养成分破坏。 2.灭菌时间少，提高了生产效率。 3.蒸汽负荷均衡，提高了锅炉利用率。 4.适于自动化操作，降低了劳动强度。 高温对培养基的影响及其防止措施 高温对培养基的不利影响： ▲会产生混浊或形成不溶性沉淀 ▲营养成分被破坏（ PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用）； ▲色泽加深（褐变如产生氨基糖等）； ▲改变培养基的pH值（通常下降0.2） ； ▲形成有害物质，抑制微生物生长； 消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂 煮沸消毒法 将水加热至100℃，煮沸15min—30min，可杀死所有营养细胞和部分芽孢，达到