62-培基配制标准操作规程文档.doc

题 目：培养基配制标准操作规程 制 定 人 ： 年 月 日 编 号 S0P-ZL-TY-062-01 审核人： 年 月 日 颁发部门：质量管理部 批准人： 年 月 日 执行时间： 年 月 日 分发部门 质量管理部、档案室 目的：本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。 范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基 职责：QC检验员对本标准的实施负责。 内容: 1．操作依据：《中国药典》2010年版二部 2、培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。 3.程序 3.1. 购买 3.1.1. 质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。 3.1.2. 培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。 3.1.3. 领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。使用时填写《干粉培养基使用记录》。 3.1.4. 检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批， 批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为 3.1.5. 配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。 3.1.6. 必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。 3.2. 培养基质量控制 3.2.1. 为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。 3.2.2. 无菌检查用培养基的适用性检查，包括无菌性检查和灵敏度检查；微生物限度检查用培养基的适用性检查指计数培养基适用性检查；控制菌检查用培养基的适用性检查包括促生长能力检查、抑制能力检查和指示能力检查。 3.2.3. 进行培养基质量控制检查应填写相应的记录，如《无菌检查用培养基适用性检查记录》、《计数用培养基适用性检查记录》、《控制菌检查用培养基适用性检查记录》。 3.2.4. 无菌检查用培养基适用性检查 无菌性检查：无菌检查用培养基均应进行无菌性检查，液体培养基每批随机取不少于5支（瓶），培养14天，经培养后应无菌生长。则可判该培养基的无菌性检查符合规定；反之无菌性检查不合格，不能使用，按7.6废弃处理。 3.2.5灵敏度检查： 3.2.5.1所用菌种及培养条件见附表1 3.2.5.2取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9管，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另外一支不接种作为空白对照，培养3天：取每管装量为9ml 的改良马丁培养基5支，分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另外一支不接种作为空白对照，培养5天：逐日观察结果。空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管均生长良好，则可判该培养基的灵敏度检查符合规定。反之无菌性检查不合格，不能使用，按7.6废弃处理。 3.2.6. 计数培养基适用性检查 3.2.6.1所用菌种及培养条件见附表2 3.2.6.2取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30℃～35℃培养48小时，计数；取白色念珠菌黑曲霉各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置23℃～28℃培养72小时，计数。同时，用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%且菌落形态大小与对照培养基上的菌落形态一致，则可判培养基的适用性符合规定。反之无菌性检查不合格，不能使用，按7.6废弃处理。 3.2.7. 控制菌检查用培养基促生长检查、抑制能力检查和指示能力检查。 用于不同检验的培养基的促生长能力检查、抑制能力检查和指示能力检查所用菌种及培养条件见