江南大学微生物学综合PPT03.ppt

噬菌体在基因工程中的应用 噬菌体可作为原核生物基因工程的优良载体，将外源目的基因导入到合适的受体细胞，从而获得具有新性状的 “工程菌” E.coli的λ噬菌体包括：必需基因—参与生命活动；非必需基因—不影响生命活动，可被外源DNA代替 载有外源遗传因子的重组λ噬菌体可整合在宿主核基因组上，两者以一个整体进行同步复制，使宿主具有新性状 钝齿棒杆菌噬菌体 钝齿棒杆菌（T6-13）是国内广泛用于谷氨酸生产的菌株，采用此菌及其相近菌株生产的环境中，普遍发生噬菌体的污染。导致生产延滞或产酸降低，甚至倒罐，给味精生产造成较严重的损失。目前国内分离的噬菌体在形态上相似。 根据血清学可分成两型：　　　　 B271和B275，有四种类型的噬菌斑。为防止噬菌体的侵袭，可在了解菌株对不同噬菌体的敏感性情况下，轮换使用不同菌株，以避免生产被迫停顿。  丙酮丁醇梭菌噬菌体（Clostridium acetobutylicum phage） 　　在丙酮丁醇连续发酵的工业生产中，容易受到该噬菌体的侵染，危害极大。常见的异常发酵有：发酵停止，不产生气泡，醪液上层澄清，呈暗黑色，出现睡眠症。正常发酵12-18小时，丙酮产量可达200mg/L，异常发酵时达到相同水平则需36-42小时，丁醇量也偏低 ，醪液的蒸馏效率低于正常的10-20%。现分离获得的丙酮丁醇梭菌噬菌体为肌尾和长尾噬菌体科。 10.病毒感染的防治原则 一、免疫预防 　　人工自动免疫 二、药物治疗 （一）化学疗剂 1．核苷类似物：病毒唑 2．其他类型抗病毒药物 （二）干扰素及其诱生剂 （三）中草药的抗病毒作用 干扰素（Interferon,IFN）它是一类分泌性蛋白，具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能。根据产生干扰素细胞来源不同、理化性质和生物学活性的差异，可分为α-1b型干扰素、β-干扰素和γ干扰素。α-1b型干扰素，常用于治疗慢性乙型、丙型和丁型肝炎。 第二节  亚病毒 subvirus 凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的分子病原体。包括类病毒、拟病毒、朊病毒 1.类病毒（Viroid） 定义： 是一类至今所知道的最小的、只含有侵染性RNA一种成分、专性活细胞内寄生的分子病原体。 如图： 马铃薯纺锤形块茎病类病毒PSTV的结构 2.拟病毒（Virusoid） 一类包裹在真病毒粒子中的有缺陷的类病毒，仅由RNA或DNA组成，其寄主称辅助病毒。 如：丁型肝炎病毒 3.朊病毒（Prion） 是一类不含核酸的传染性蛋白质分子，能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构象变化从而致病 朊病毒主要引起哺乳动物疾病，潜伏期也极长，繁殖速度十分缓慢，对中枢神经系统有严重影响 朊病毒的三维结构 人的主要传染疾病为： 克-雅氏病 库鲁病 牲畜的主要传染疾病是： 疯牛病（牛海绵状脑病） 羊搔痒病 * 装配成熟的病毒颗粒大小恒定不再改变，不同病毒间差异很大，从十几纳米到十几微米不等。最小的如植物的联体病毒（Geminiviruses ）直径仅18-20nm，最大的动物痘病毒（Poxviruses）大小达300-450x170-260nm，最长的如丝状病毒科（Filoviridae）病毒粒子大小为80x790-14,000nm。 病毒个体微小，测量病毒大小的单位是毫微米（nm），即1/1000微米。大型病毒（如牛痘苗病毒）约200～300nm；中型病毒（如流感病毒）约100nm；小型病毒（如脊髓灰质炎病毒）仅20～30nm。 研究病毒大小可用高分辩率电子显微镜，放大几万到几十万倍直接测量；也可用分级过滤法，根据它可通过的超滤膜孔径估计其大小；或用超速离心法，根据病毒大小，形状与沉降速度之间的关系，推算其大小。 * 病毒学名词解释 毒粒（virion）是病毒在复制过程中的一种完整的成熟的病毒颗粒，有固定的形态和大小，而且一般都有侵染性。所以说一般具有侵染性是因为有些病毒的基因组核酸是分节段的，如雀麦花叶病毒的基因组核酸有四种。而且RNA1、RNA2和RNA3、RNA4分装在大小形状相同的三种球形颗粒中，只有三种颗粒混合，才具有侵染性。 　　外壳（capsid） 是由多个病毒蛋白亚基组成的包裹在病毒基因组核酸外面的结构。 　　壳粒（capsomer） 组成外壳的结构亚基，并非总是均匀分布的，往往聚集成群体，二个、三个、五个甚至六个亚基聚在一起，用负染法在电镜下所分辨开的一个个亚基，可能并非单个结构亚基，而是它们的群体，实际上是形态亚基称之为壳粒。 　　包膜（envelop） 大多数动物病毒，在毒粒外被有由糖蛋白，脂肪所形成的外膜，称之为包膜。糖蛋白在膜上往往形成各种形状的突起，包膜在识别寄主、侵入