高中生物必修1 实验:检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质.pptVIP

高中生物必修1 实验:检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质.ppt

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高中生物必修1 实验:检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

实验原理 显色反应 实验步骤 1、还原糖的检测 (1)取一支试管1,注入2mL梨匀浆; (2)另取一支试管2,注入1mL斐林试剂甲液和1mL斐林试剂乙液,振荡,混合均匀,制成斐林试剂; (3)将试管2中刚配制好的斐林试剂注入试管1中,振荡混匀; (4)将试管放入烧杯中水浴加热,观察颜色变化。 2、脂肪的检测 (1)取材:取一片花生切片,选择最薄切片放在载玻片中央; (2)染色:滴加2-3滴苏丹Ⅲ染液染色3分钟,用吸水纸吸去染液; (3)去浮色:再滴加1-2滴体积分数50%的酒精溶液,洗去浮色; (4)制片与观察:吸去酒精,滴加一滴清水,盖上盖玻片,制成临时装片,在显微镜下找到子叶最薄处,寻找橘黄色脂肪颗粒 3、蛋白质的检测 取一支试管,加入2mL稀蛋清,再加入双缩脲试剂A1mL,振荡摇匀,再加入双缩脲试剂B4滴,振荡摇匀,观察颜色变化。 * * 颜色反应 染色剂 有机物 紫色 双缩脲试剂 蛋白质 橘黄色/红色 苏丹Ⅲ/Ⅳ 脂肪 砖红色 斐林试剂 还原糖 蓝色 碘液 淀粉 糖类 注意 斐林试剂极不稳定,要现配现用,先混合后一次加入。 甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 使用时,将4—5滴乙液滴入2ml甲液中,配完后立即使用。 用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程: 浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 蛋白质鉴定原理 鉴定生物组织中是否含有蛋白质,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。 在碱性溶液中,双缩脲能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫双缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。 紫色 注意 双缩脲试剂A: 质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 双缩脲试剂B: 质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 使用时,先加入2ml双缩脲试剂A,振荡摇匀;再加入3—4滴双缩脲试剂B。 紫色 砖红色沉淀 反应现象 不需加热,摇匀即可 水浴加热 反应条件 先加A液1ml,摇匀; 再加B液3~4滴,摇匀 甲、乙两液等量混合均匀后再注入 (即现配现用) 添加顺序 0.01g/ml CuSO4溶液 0.1g/ml NaOH溶液 0.05g/ml CuSO4溶液 0.1g/ml NaOH溶液 B液 A液 乙液 甲液 成??? 分 蛋白质或多肽 可溶性还原性糖 鉴定物质 双 缩 脲 试 剂 斐 林 试 剂 ? ? 斐林试剂与双缩脲试剂的比较

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