草履虫培养观察.docVIP

培养和观察草履虫 一、实验准备 （一）材料 干稻草、旧稻草垫子、干玉米雄花穗、干荷叶、小麦粒、离芭叶、干酵母、动物内脏（肝、胰、甲状腺等）、蛋黄、牛肉汁（50g牛肉、100g水，煮熟）。 （二）用品 显微镜、放大镜、电炉、恒温培养箱、载玻片、盖玻片、滴管、微吸管、解剖针、烧杯、培养皿、凹玻璃片、纱布、吸水纸、大头针、琼胶、质量分数为3％的甲基纤维素溶液、碘液、葡萄糖、氯化钠、质量分数为１％的洋红溶液、质量分数为0．1％的中性红溶液。 （三）采集和培养 1．采集 选取多处进行采集。凡是有机物含量丰富的污水，均可采250～500mL水样，当场用放大镜检查。水样镜检，凡呈乳白色，个体较大，圆柱状，一端稍圆一端稍尖的动物，就是草履虫。如果多次检查均未发现草履虫，水样可弃之，另选别处采集。水样取回，经显微镜检查，凡含有草履虫的水样，要在离水样瓶１０～２０cm处，放置一盏灯，经以２４h照明，使草履虫向水的上层聚集。 2．培养液制备 制备方法较多，可根据教学实际进行选用。 （1）稻草培养液 干稻草10g，剪成3Cm长，放人烧杯，加水1000m1，煮沸10～15min，放凉，补足失去水分。在１000mL水面处划一刻度线，便于日后失水再补。 （2）玉米雄花穗培养液 干玉米雄花穗15g，剪成3Cm长，加水１000m1，煮沸10～15min。 （3）荷叶培养液 干荷叶50g，适当撕碎，加水１000mL，煮沸15～20min。 （4）麦粒培养液 小麦粒１００颗，加水１０００mL，煮沸10～15min。 （5）离芭、稻草混合培养液 离芭叶25g，加水500m1，煮沸5min，补足失去的水分后，再加稻草培养液500m1。 （6）干酵母培养液 市售干酵母0．59，加水1000mL，摇荡均匀后备用。 （7）脏器培养液 动物内脏5g，剪碎，加水1000m1，浸泡1d，滤去内脏与残渣，留下纯净培养液。 （8）蛋黄培养液 煮熟鸡蛋黄2g，加水1000m1，搅拌均匀。 （9）稻草垫培养液 旧稻草垫，取其10g，剪成3cm长，加水1000mL，再加50g葡萄糖。 以上方法中，第1～8种，无论培养液煮沸与否均要放进恒温箱，在25～300C下培养1～2d，目的是促使培养液长出细菌，以便接种草履虫后，供草履虫索饵。而第9种方法，既不需煮沸培养液，又不需接种草履虫，直接将培养液放进恒温箱培养，只要稻草上附有草履虫包囊，当包囊处于适宜条件时，草履虫就会破囊而出，进行旺盛的代谢活动，在5～7d内大量繁殖起来。 牛奶液培养??将牛奶液搅拌均匀后，移入草履虫，温度保持在摄氏22度，二三日后，草履虫迅速繁殖，并且出现处于分裂生殖状态的草履虫。5日内虫体数量达到高峰，以后每隔2星期在原有的培养液内再加入牛奶液，可长期维持草履虫的生活。20℃～25℃温度下放置。大约7～10天，就会看到试管液面处有许多游动的小白点，这些小白点就是草履虫。 3．培养 下面介绍三种培养方法。 （1）采集的水样经一昼夜照光，从水面下1Cm处，在瓶壁上已经形成一圈“白线”的地方，用微吸管取液。滴一滴到载片上，经镜检证实水滴中只含草履虫，无任何其他微型生物时，就可用一个新的干净滴管吸培养液，将载片上的草履虫吹人培养瓶中，放置在25～300C环境中继续培养5～7d，草履虫就会大量繁殖起来。 （2）如果水样中混有少量其他微型生物，可以在载片上先滴一滴牛肉汁，再滴一滴含有草履虫的水样，两滴间距2cm左右，用解剖针从肉汁一端引一条线到含有草履虫的水滴上。两滴连结后，用放大镜仔细观察，会发现草履虫对牛肉汁敏感性很强，草履虫游到牛肉汁滴的速度也快。然后迅速将载玻片放置在显微镜下检查，在确认牛肉汁滴内尤其他微型生物时，迅速用吸水纸切断连结线，用纱布擦干另一侧的水滴，用于净滴管把含草履虫的牛肉汁吹人培养瓶中。如此重复操作几次，然后将培养瓶放在25～300C温度下继续培养，5～7bd后就会有大量草履虫繁殖出来。 （3）如果水样中混杂微型生物的种类与数量过多，不易排除，就需要采用逐步扩大法。一般是从水样中取液，在凹玻片内滴上1～2滴，放置在显微镜下，边观察边用微吸管吸走其他微型生物。当凹坑水中无任何其他微型生物而只含草履虫时，往凹坑放少许培养液，在25～300C下培养，每日补加１／３～２／３培养液。如果几天后，草履虫数量有所增加，就将其转入表面皿或培养皿，继续扩大培养。如果再过几天后草履虫纯化培养效果理想，数量又有所增加，就要再转入大容器培养液继续培养，一直到大容器培养液出现云雾状群落，镜检全是草履虫时为止。 这里特别需要指出的是，草履虫的培养有可能失败。究其原因很多，其中有两点是主要的：其一，可能是接种草履虫的数量过少，个体质量又较差，它们进入新环境后，遇有不适，很快死去，未能传宗接代；