衡阳地区葡萄主要病害的调查及其防治.doc

衡阳地区葡萄主要病害的调查及其防治 衡阳地区葡萄主要病害的调查及其防治 【中 文 摘 要】 本文通过对衡阳各大葡萄种植区的病害调查，其结果显示葡萄霜霉病和穗轴褐枯病是最为普遍的病害。该实验通过定期去葡萄种植地观察病害发生情况,并记录病症，选择有代表性的病样带回实验室。将样品进行保湿，分离出病叶上的病原菌在PDA培养基上培养。根据病菌的菌落，菌丝，孢子等形态特征进行鉴定 ,结果表明:穗轴褐枯病和葡萄霜霉病的病原菌分别为葡萄生链格孢霉和葡萄单轴霉。根据实验结果，为衡阳地区的葡萄病害提出了防治措施。 关键字： 葡萄病害；葡萄霜霉病；穗轴褐枯病；病原菌；防治 【Abstract】 Based on the survey major diseases in grape growing areas of Hengyang , the results show that cob grape downy mildew and brown blight were the most common diseases. The occurrence of disease was observed regularly in different vineyards and recorded symptoms, then chose some representative samples back to the laboratory. The samples were moistured for 24 hours and isolated pathogens from diseased leaves by PDA medium. According to the morphological characteristics of colonies, mycelium,and spores observed in the experiment, the results showed that cob grape downy mildew and brown blight pathogen were Alternaria viti and Plasinopara Vitiocola . Following the results for the Hengyang grape disease, we proposed control measures . 【Keywords】grape disease; grape downy mildew; cob brown blight; pathogen 1.1实验材料 实验试剂：马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）（去皮马铃薯200g，琼脂粉15g，葡萄糖20g，加水至1000ml），75%酒精 ，升汞，灭菌水。 实验用具：锥形瓶（若干），培养皿（若干），烧杯（若干），接种环，接种钩，镊子、剪刀，酒精灯，火柴，无菌薄膜，瓶塞，细线，标签纸，废报纸。 实验设备：恒温培养箱，微波炉，无菌操作台、光学显微镜,干燥箱。 1.2实验方法 1.2.1采样 定期去各大葡萄种植地观察病害发生情况,并记录病症的发生特点，选择有代表性的病样带回实验室，进行下一步的分离和鉴定。 1.2.2 病害症状观察 在田间对发病葡萄植株病害的症状进行形态学描述，并用相机对症状进行拍照。对采集的典型病叶或病组织进行保湿24h或48h，在显微镜下观察部分病原菌的形态并拍照。 2.1 病原菌的分离 2.1.1 分离的准备工作 将实验中需要使用的无菌培养皿、经微波炉解冻的PDA培养基、酒精灯、消毒酒精、镊子等放入无菌操作台中，打开紫外光灯，对操作台进行灭菌处理。 2.1.2 分离的材料选择 从采集的样品中，选出病害较典型的部分，在病害处与健康叶片的交界处进行切割，分离出病原组织。 2.1.3 组织表面消毒 ①配制0.1%的升汞溶液 ②在无菌操作台内进行组织表面消毒 a.用镊子将切开的病原组织在75%酒精浸2～3秒钟，然后在0.1%的酸性升汞水溶液中浸泡3～5min，最后用灭菌水清洗洗3次 。 b. 用镊子挑取消毒后的病组织分别转接到PDA培养基中（一个培养皿中植入5-6片），编号后将植入病组织的培养皿放到恒温培养箱中，然后在26℃的条件下进行培养。 2.2 病原菌的纯化 用直径5mm 灭菌打孔器在供试菌落边缘打取菌饼,然后将菌块移植到PDA 平板中心，在26℃的条件下进行培养。 2.3 病原菌的鉴定 分离纯化后的病原菌培养五至七天时，此时菌落颜色已经变成黑色，挑取菌丝和孢子在光学显微镜下观察，根据菌丝和孢子的形态进行鉴定。 对于在病害叶表面可直接观察到菌丝体的病原菌可直接用镊子挑取少许菌