液相色谱前处理课件.pptVIP

液相色谱前处理?  固相萃取（Solid Phase Extraction, 简称SPE）是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要用于样品的分离，净化和富集。主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度 ? SPE技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。 固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH2等3）物理吸附：Florsil硅酸镁吸附剂、Alumina氧化铝等 固相萃取柱的选择 首选根据目标化合物与干扰物的差异，如极性，分子量，pka值等，选择合适的填料。 C18柱主要用于反相萃取，适合于非极性到中等极性的化合物，如抗菌素、巴比妥酸盐、酞嗪、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶性维生素、杀真菌剂、除草剂、环境农药、PAH和PCB残留、食品添加剂、碳水化合物、对羟基甲苯酸取代脂、苯酚、邻苯二甲酸酯、类固醇、表活化剂、茶碱、水溶性维生素… C8柱比C18的非极性吸附更弱些。?C2柱相对于C18和C8，因为短链，保持作用小得多，适合非极性化合物。?硅胶Silica柱极性化合物萃取，如乙醇、醛、胺、药物、染料、除草剂、农药、酮、含氮化合物、有机酸、苯酚、类固醇… 苯基Phenyl柱相对于C18和C8，吸附更弱，适合于非极性到中等极性的化合物，尤其是苯系物。?氰基Cyano-cn柱反相萃取：适合于中等极性化合物，正相萃取：适合极性化合物，如黄曲霉毒素、抗菌素、染料、除草剂、苯酚、类固醇，弱阳离子交换萃取：适合碳水化合物、阳离子化合物…氨基Amino-NH2柱正相萃取：适合于极性化合物，弱阴离子交换萃取：适合碳水化合物、弱性阴离子和有机酸化合物… 酸性氧化铝Alumina?A柱PH~5极性化合物离子交换和吸附萃取，如维生素…碱性氧化铝Alumina?B柱PH~8.5阳离子交换和吸附萃取?中性氧化铝Alumina?N-neutral柱PH~6.5，极性化合物吸附萃取，调节PH，阳和阴离子交换，适合维生素、抗菌素、芳香油、酶、糖苷、激素… 硅酸镁Florisil柱极性化合物的吸附萃取，如乙醇、醛、胺、药物、染料、除草剂、农药、PCBs、含氮化合物、有机酸、苯酚、类固醇…强阴离子交换SAX柱适合阴离子、有机酸、核酸、核苷酸、表面活性剂，容量：0.2毫当量/克?强阳离子交换SCX柱适合阳离子、抗菌素、有机碱、氨基酸、儿茶酚胺、除草剂、核酸碱、核苷、表面活化剂，容量：0.2毫当量/克 针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）： 活化---- 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸）上样---- 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱 上。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min）?淋洗---- 最大程度除去干扰物。（建议此过程结束后把小柱完全抽干） 洗脱---- 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。（注意流速不要过快，以1ml/min为宜） 填料保留杂质固相萃取操作一般有三步（见图2）：?? ?? ? 活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。（注意整个过程不要使小柱干涸）?? ?? ? 上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集（注意流速不要过快）?? ?? ? 洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。（注意流速不要过快） 型号:HX-12A 处理样品数: 12 SPE辅件一般有真空系统、吹干装置、大容量采样器和缓冲瓶（以上辅件均需自行搭配购买）。 主要特点： 1.每路配有独立的阀门，控制方便，精确控制流速，经久耐用； 2.压力表安装在密封盖上方，便于观察； 3.试管架高度可调，满足不同需要 ； 4.除气室使用特硬加厚玻璃外，其他部件均采用四氟材料，有较强的抗腐蚀性； 5.防交叉污染、防雾化真空槽设计； 6.SPE小柱质量稳定，样品回收率高,精密度好易于收集分析物组合,能处理小体 积试样； 7.可配大容量采集器，快速浓缩干燥装置，可批量处理样品，大容量采集器，直接将低粘度样品从样品容器传输至Visiprep SPE真空样品处理装置的固相萃取管。 鸡蛋