任务十四测定食品中毒素(天然毒素)和激素摘要.pptVIP

食品分析与检验技术 食品分析与检验技术 化学工业出版社 任务十四 测定食品中毒素（天然毒素）和激素 李京东 余奇飞 刘丽红 技能目标 1．会测定贝类产品中麻痹性贝类毒素含量。 2．会测定粮食样品中黄曲霉毒素B1的含量。 3．会测定动物性食品中克伦特罗残留量。 4．会测定食品中己烯雌酚残留量。 知识目标 明确食品中毒素和激素的测定原理。 项目一：测定贝类食品中麻痹性贝类毒素 一、案例 二、选用的国家标准 GB/T5009.213-2008贝类中麻痹性贝类毒素的测定。 三、测定方法 1．试样制备 （1）牡蛎、蛤、贻贝、扇贝等：用清水洗净贝类外壳，切断闭壳肌，开壳，用清水淋洗内部，除去泥沙及其它外来杂质，仔细取出贝肉，勿割破肉体，开壳前不用麻醉剂或加热。收集约200g肉沥水5min，避免贝肉堆积，捡出碎壳等杂物，贝肉均质。 （2）冷冻贝类：室温下将样品自然融化，其余操作同上。 （3）贝类罐头：将罐内所有内容物（包括贝肉和汁液）倒入均质器中均质，大容量罐头可以过滤贝肉，分别称重，然后将固形物和汁液按比例混匀，充分均质。 （4）干贝类：等体积0.18mol/L盐酸溶液浸泡24～48h（4℃冷藏），按照上法沥干，分别存放贝肉和酸液备用。 2．保存 样品不能及时送检，可以取200g样品用200mL0.18mol/L盐酸浸泡，4℃冷藏保存。 3．麻痹性贝类毒素(PSP)标准品对照试验 4．试样提取 （1）将100g处理后样品于800mL烧杯中，加0.18mol/L HCl溶液100mL，充分搅拌，均质，调pH于2.0～4.0，需要时可以用5mol/L HCl或0.1mol/L NaOH逐滴滴加，并不断搅拌，防止毒素破坏。 （2）混合物加热，徐徐煮沸5min，室温冷却后倒入200mL量筒中，调pH于2.0～4.0，pH勿大于4.5稀释至200mL。 （3）混合物倒回烧杯中，搅拌均匀，自然沉降至上清液半透明，不阻塞针头为止，必要时可以用3000r/min离心上清液或混合物5min。 5．小鼠试验 （1）取19.0～21.0g健康雄性小鼠6只，称重并记录重量，分空白组和实验组，每组3只。 （2）对每只实验组小鼠腹腔注射1mL提取液，注射时若有一滴以上提取液逸出，须将该小鼠丢弃，并重新注射1只小鼠。 （3）记录注射完毕时间，仔细观察并用秒表记录小鼠停止呼吸时的死亡时间（到小鼠呼出最后一口气时）。 （4）若小鼠死亡时间小于5min则要稀释样品提取液后，注射另一组3只小鼠，得到5～7min的死亡时间，稀释提取液时，要逐滴加入0.1mol/L或0.01mol/L HCl，调节pH至2.0～4.0。注射样品后，有1只或2只小鼠的死亡时间大于7min，则需要注射至少3只小鼠以确定样品的毒力。 6．结果计算与判断 （1）待测样品校正鼠单位（CMU）确定： 根据待测样品的小鼠死亡时间，在表14-1PSP 死亡时间-鼠单位的关系，查出相应的鼠单位；再根据小鼠的质量，在表14-2 小鼠体重校正表中查出质量校正系数，同一只小鼠的鼠单位（MU）与质量校正系数之积，即该小鼠的CMU。受试组3只小鼠CMU的中位数受试组中位数。 （2）PSP的计算与结果陈述： ①PSP结果计算： X=CMU1×CF×DF×200 式中 X——每100g样品中PSP的含量，μg/100g； CMU1——检测样品受试组小鼠的中位数校正鼠单位 CF——毒素转换系数； DF——稀释倍数； 200——样品提取液体积，mL。 ②PSP毒力结果表述： 若空白对照组小鼠正常，则报告待测样品中PSP含量为：×××μg/100g。 （3）MU毒力的计算与结果陈述： ①MU毒力计算： Y= CMU1×DF×200 Y——每100g样品的MU值，MU/100g； 其余同上式 ②MU毒力与结果表述： 空白组正常情况下表述如下： 若小鼠死亡时间大于60min，则待测样品的鼠单位即小于0.875MU/g。 若小鼠死亡时间小于5min，则应对样品提取液稀释后，注射另一组3只小鼠，得到中位数死亡时间在5～7min为止，根据最后的稀释实验结果计算样品的鼠单位毒力，报告该样品的鼠单位为×××MU/100g。 若实验组中位数死亡时间大于7min，则直接计算确定样品鼠单位毒力，报告该样品的鼠单位为×××MU/100g。 若实验组中所有小鼠在15min内无死亡，则报告该样品鼠单位小于400 MU/100g。 7.试剂 （1）0.18mol/L盐酸：15mL浓盐酸稀释至1L。 （2）5mol/L盐酸：41.7mL浓盐酸稀释至100mL。 （3）0.1mol/L氢氧化钠溶液：4.0g氢氧化钠溶于1L水。 （4）PSP毒素（saxitoxin）标准溶液(10μg/mL)：20%乙醇溶液，用5mol/L盐酸调节pH至2.0～