研究生科研讲座课件.pptVIP

如何选题和设计课题 科研基本训练专题讲座 1.尽快完成观念的转变: 从“学生”转变为“科研工作者” 从“学习”转变为“研究”“探索” 克服现在学生的一些弱点： ①应试教育和就业问题，缺乏对科学研究的激情。 ②众多“杂事”，众多的“节假日”。 ③社会的浮躁与急功近利，潜不下心搞学问。 1、定研究 “方向”和“领域” 所在Lab（导师）固定的研究方向 1)熟悉实验室PI的工作（查文献并浏览导师发表的文章） 2)参加 Lab meeting, Journal club 3)熟悉实验室工作环境与实验操作 (要泡实验室；参与师兄姐实验,第一学期年)，重点是熟悉实验仪器 免疫学领域研究热点 肿瘤免疫的研究进展 固有免疫的研究进展 T细胞分群、分化、发育的研究进展 NK细胞的研究进展 microRNA与免疫调节 自身免疫病的病因及治疗 Key questions: how the innate immune response is regulated? 1、明确课题的研究目的和研究内容。 研究内容适当（做什么，编“故事”） 小心求证 小题大做深做 不要大题小做浅做；“深入”与“全面”矛盾 针对研究目的（假说）决定研究内容 避免研究内容不足以得到预定目的（小于，少于） 避免研究内容超越预定目的（大于，多于） [例]背景：巨噬细胞活化可诱导新基因A的表达。 假设：A基因可调控巨噬细胞的活化。 课题：研究A基因对巨噬细胞活化的作用和机制。 研究内容1. A基因是否对巨噬细胞活化有作用？ 研究内容2：A基因调控巨噬细胞活化的机制？ 结论：A基因是巨噬细胞的活化调控因子。 2、实验设计要严谨全面，特别是对照实验（包括阴性和阳性对照），病例数，严格质控（repeat, duplicate) 对照试验检测你的实验体系； 一个试验至少要重复三次或更多次； 测量的数据要重复三次至六次； 临床病例材料要几百例； 3、技术路线要合理 4、实验方法要可靠并公认；动物模型要成熟公认。 ⑴ 方法选择： 目的决定方法选择；PCR， WB 实验条件选方法；MS 工作者熟练程度选方法 ⑵ 模型：经典与新建（是否需与人一致或接近） 1）新基因的生物信息学分析: 编码产物预测分析 序列同源性分析 蛋白质功能域分析 2）新基因的体内表达规律分析 mRNA水平的表达谱分析 蛋白质水平的表达分析 主要分子生物学技术 Western blotting-蛋白印迹 Confocal microscopy-激光共聚焦 Chromatin immunoprecipitation-染色质免疫沉淀 Real-time PCR-实时定量PCR 流式细胞术 好的实验设计包括: 明确的目标（假说）； 严谨的（实验）设计； 合理的（技术）路线； 可靠的（实验）方法。 Taganov et al. NF-κB-dependent induction of microRNA miR-146, an inhibitor targeted to signaling proteins of innate immune responses. PNAS. 2006; 103(33): 12481–12486. Liu et al. MiR-147, a microRNA that is induced upon Toll-like receptor stimulation, regulates murine macrophage inflammatory responses. PNAS. 2009; 106(37): 15819–15824. Taganov et al. MicroRNAs and immunity: tiny players in a big field. Immunity. 2007; 26(2): 133–137. Xiao et al. MicroRNA control in the immune system: basic principles. Cell. 2009; 136(1): 26–36. O’Connell et al. MicroRNA-155 is induced during the macrophage inflammatory response. PNAS. 2007; 104, 1604–1609. O’Connell et al. Inositol phosphatase SHIP1 is a primary target of miR-155. PNAS. 2009; 106(17): 7113–7118. Cardoso