下咽癌中hMLH1和hMSH2蛋白的低表达及临床意义.docVIP

　　下咽癌中hMLH1和hMSH2蛋白的低表达及临床意义 【摘要】 目的探讨下咽癌和正常喉组织中hMLH1和hMSH2蛋白的表达和临床意义。方法 采用免疫组化法检测下咽癌和正常喉组织中hMLH1和hMSH2蛋白的表达。结果 在下咽癌中hMLH1和hMSH2蛋白的阳性率为54%、56%，显著低于正常喉组织中的80%、85%，差异具有统计学意义(Plt;0.05)。hMLH1和hMSH2的表达与下咽癌的分化程度和淋巴结转移有关(Plt;0.05)，与T分期无明显相关性。结论 hMLH1和hMSH2在下咽癌早期发生及发展中起重要作用，hMLH1和hMSH2的表达与下咽癌的分化程度及预后有关。 【关键词】 下咽癌;正常喉组织;hMLH1;hMSH2;免疫组织化学 　hMLH1 and hMSH2 Protein in Hypopharyngeal Carcinoma Loa and normal laryngeal tissue.Methods The expression of hMLH1 and hMSH2 protein munohistochemistry SP method in 50 cases of hypopharyngeal carcinoma and 20 cases of normal laryngeal tissue.Results The expression rates of hMLH1 and hMSH2 in hypopharyngeal carcinoma al laryngeal tissue 80%，85%, and the statistics parison betetastasis of lymphonode of hypopharyngeal carcinoma(Plt;0.05)，and there portant roles in the early occurrence and development of hypopharyngeal carcinoma.The expressions of hMLH1 and hMSH2 are related to hypopharyngeal carcinoma differential degree and prognosis. 　　Key a;normal laryngeal tissue;hMLH1;hMSH2;immunohistochemistry 　　hMLH1与hMSH2是人类错配修复基因(humane mismatch repair gene,hMMR)家族中非常重要的两个基因，维持着DNA复制的高保真性及起着控制基因突变的作用，它们的功能缺陷被认为是肿瘤发病的重要机制之一，并成为近年来研究的热点。有研究表明，hMMR与食管癌、胃癌、宫颈癌等肿瘤[1]关系密切，但在下咽癌中的表达状况国内尚未见报道。本实验通过免疫组化方法检测下咽癌和正常喉组织中的hMLH1和hMSH2蛋白的表达状况，探讨它与下咽癌临床病理特征的关系。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料来源 下咽癌包括梨状窝癌、环后癌、咽后壁癌，因后两种类型较少见，且以放化疗为主，故本研究主要讨论梨状窝癌。所检测组织选自河南科技大学第一附属医院2008～2010年耳鼻喉科、头颈外科手术切除存档的下咽癌石蜡标本50例，标本均为第1次住院的原发下咽癌(梨状窝癌)，术前未进行放疗和化疗;另选正常喉组织20例作对照。50例下咽癌病例中，T1期16例，T2期24例，T3期10例，T4期0例;高分化鳞癌25例，中分化鳞癌15例，低分化鳞癌10例;有淋巴结转移12例，无淋巴结转移38例。 　　1.2 试剂 鼠抗人MLH1、MSH2单克隆抗体试剂，广谱SP试剂盒，PBS磷酸盐缓冲液等，均采购于北京中杉金桥生物技术公司。 　　1.3 实验方法 采用免疫组化SP法，试验中染色过程按照北京中杉金桥生物技术公司提供的SP试剂盒说明书进行。用北京中杉金桥生物技术公司提供的阳性照片作阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。 　　1.4 结果判定 hMLH1、hMSH2蛋白表达主要位于细胞核和(或)胞浆，胞核和(或)胞浆有棕黄色颗粒为阳性细胞。每张切片随机观察5个高倍视野，每个视野记数100个细胞，阳性细胞数lt;10%为阴性片，阳性细胞数gt;10%为阳性片。 　　1.5 统计学处理 实验所得数据均采用SPSS12.0统计软件进行处理，采用?2检验分析结果，Plt;0.05为差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 50例下咽癌、20例正常喉组织中hMLH1、hMSH2蛋白阳性率分布 见表1，两组hMLH1蛋白表达差异比较chi;2=4.076，Plt;0.05，hMSH2蛋白表达差异比较ch