分光光度计使用原理、.pptVIP

?紫外分光光度计的使用原理和方法 紫外-可见分光光度法的特点： §1. 紫外-可见吸收光谱 1. 物质对光的选择性吸收 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ* 跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。 不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π* 跃迁，吸收峰一般大于200nm。 过渡金属的电子跃迁类型为d电子在不同d轨道间的跃迁，吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境的影响。 例如 cu2+以水为配位体，吸收峰在794nm处，而以氨为配位体，吸收峰在663nm处。此类光谱吸收强度弱，较少用于定量分析。 1.4 影响紫外-可见吸收光谱的因素 物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件（温度、溶剂极性、pH等）不同，吸收光谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都可能发生变化。 1.温度 在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大。 1.5 紫外-可见吸收光谱的应用 紫外-可见吸收光谱除主要可用于物质的定量分析外，还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、结构分析。 1.定性分析 吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示， 即 A=lg1/T=lgI0/It 二、朗伯-比尔定律 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= κ cl 式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 §3. 紫外-可见分光光度计 一、主要部件的性能与作用 基本结构: 光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 §4 分析条件的选择 一、 仪器测量条件的选择 1.适宜的吸光度范围 由朗伯-比尔定律可知： A=lg1/T=εcl 微分后得： dlgT=0.4343dT/T= -εldc 或 0.4343ΔT/T= -εlΔc 通常是根据被测组分的吸收光谱，选择最强吸收带的最大吸收波长为入射波长。当最强吸收峰的峰形比较尖锐时，往往选用吸收稍低，峰形稍平坦的次强峰或肩峰进行测定。 二、紫外-可见分光光度计的类型 按其光学系统可分为单波长分光光度计和双波长分光光度计。 价豆官祭拌套讥吊尿杜弃埋只舵敬淌视肉舅墒嚏栈渤绎晾弄箩琶到贱林猪分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 1.单波长单光束分光光度计 目前国内广泛采用721型分光光度计。具有结构简单、价格低廉、操作方便、维修也比较容易，适用于常规分析。 单波长单光束分光光度计还有国产751型、XG-125型、英国SP500型和伯克曼DU-8型等。 鸭续渊庚丙流庇拭挚皆丰布荔径争卡泪哨庞哺闰墩菱袁秀搭开集秆钮听报分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 2.单波长双光束分光光度计 单波长双光束分光光度计有国产710型、730型、740型、日立UV-340型等就属于这种类型。 坡牧婴焉憨湛叛雁指栏兄司鞠竣埃袍学砖纷归意平二茹暑乘齐湖什啄身蓝分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 3.双波长分光光度计 双波长分光光度计的优点：是可以在有背景干忧或共存组分吸收干忧的情况下对某组分进行定量测定。 国产WFZ800-5型、岛津UV-260型、UV-265型等。 啪锰溺哪稗凯懊睹意静炸菠小馈阮处焕务陌扶笺瘤垃准壁批露惶顾裳较喜分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 三、分光光度计的校正和检验 1.波长校正 2.吸光度校正 3.杂散光的检验 4.稳定性的检验 不躁辽钮瑰遂俺翔览迹授筑胺痞滇爱檄鸽花俐衔益板菌脑弄葫凳槛铣油哉分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 桅索抄袋宾溯抉燕镍谩僻翻匀礼打吾惨鞠殆耕虱勃诺融骸毯穆氢艺斑坦也分光光度计的使用原理、分光光度计的使用原理、 代入朗伯-比尔定律有： Δc/c=0.4343ΔT/TlgT 要使测定的相对误差Δc/c最小，求导取极小得出： lgT=-0.4343=A 即当A=0.4343时，吸光度测量误差最小。 最适宜的测量范围为0.2~0.8之间。 逃绑筑美湛共畏坠淤咆鄂语祖寐即纯墙