血糖测定操作步骤及评分标准2015.docVIP

选手班级： 选手姓名： 选手学号： 标本号： 血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 竞赛时间：15分钟 一、说明 1．本题满分100分，完成时间15分钟。 2．要求独立完成，不得相互询问或讨论。 3．考核成绩为操作过程评分、操作结果评分和考核时间评分之和。 4．全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额。 二、实验原理 葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸（D-葡萄糖酸δ内酯），并产生过氧化氢： 葡萄糖+2H2O+O2葡萄糖酸+2H2O2 在色原性氧受体（如联大茴香胺、4-氨基安替比林偶氮酚）的存在下，过氧化物酶催化过氧化氢，氧化色原物质，生成有色化合物。其颜色深浅与血清葡萄糖含量成正比。 三、实验器材 721分光光度计、小号试管≤7支、试管架1个、手动可调式移液器5～50μl、1ml和10ml刻度吸管各两支、记号笔1支、水浴箱、擦镜纸，废物容器等。 四、实验试剂 葡萄糖标准液、生理盐水、0.1mol/L磷酸盐缓冲液、酶试剂、酚试剂等组成的试剂盒。 五、实验标本 新鲜血清。 六、操作步骤 取3支小试管，按表进行操作。先配制10ml酶酚混合试剂（试剂比例R1：R2=9:1）。 加入物（ml） 测定管 标准管 空白管 血清 0.03 葡萄糖标准应用液 0.03 生理盐水 0.03 酶酚混合试剂 3.0 3.0 3.0 混匀，置37℃水浴中，保温10min，分光光度计波长500nm，比色杯光径1.0cm，以空白管调零，分别读取标准管和测定管的吸光度。 七、数据记录与计算 1．数据记录 标准管吸光度 测定管吸光度 裁判签名确认 2．计算血清葡萄糖浓度（写出计算公式及过程） 裁判签名确认 八、报告 （如：血清葡萄糖：△.△△ mmol/L）。 裁判签名确认 选手班级： 选手姓名： 选手学号： 标本号： 血糖测定（葡萄糖氧化酶法）评分标准 序号 项目 考核内容 分值 扣分标准 扣分 得分 1 准备工作 报告参赛项目及序号 5 漏缺一项 1 着白大衣、帽、口罩、手套并按要求佩戴参赛签 着装不整、漏缺某一项 1 仪表端庄、头发符合要求 仪容、着装不整 1 小号试管、试管架、移液器及配套吸头、记号笔1支 缺选及多选、台面凌乱 1 检查仪器、试剂、标本状态并摆在操作台合理位置 无检查 1 2 操作 ①试管编号 ②空白管加蒸馏水30μl ③标准管加葡萄糖标准液30 μl ④测定管加血清30μl ⑤各管分别加酶工作液3 ml ⑥各管置37℃水浴保温10分钟取出比色 12 试管无编号 1 空白管加蒸馏水 1 标准管加葡萄糖标准 1 测定管加血清30μl 1 各管分别加酶工作液 1 加液顺序错 1 加错液 1 加液量不准确 1 无混匀 1 混匀不规范 1 无水浴 1 水浴时间不准确 1 反应液无倒回原试管 2 3 用722分光光度计比色 ①调波长（500nm） ②清洗比色杯，将各管溶液倒入比色杯，置比色槽中 ③调“T 100%”和“T 0”，重复2次 ④进行比色测定，记录读数，反应液倒回原试管 ⑤回位至显示器出现“100.0” ⑥洗干净比色杯（三次） 13 无调波长 1 调波长不准 1 无调T100% 1 无调T0 1 分光光度计闭盖预热 1 双手碰触变色杯光滑面 1 比色后无洗干净比色杯 1 未用擦镜纸擦拭比色杯 1 比色杯未正确放比色槽 1 显示器未稳定时读数 1 比色液体未达杯高一半 1 反应液无倒回原试管 1 读数不准确 1 4 数据与报告 原始记录完整、规范 5 不完整、不规范 1 单位正确 不正确 1 公式正确 不正确 1 计算方法正确 不正确 1 报告完整、正确 不完整、不正确 1 5 计数结果 相对误差=(︱X－T︱/T) （X为计数值，T为靶值） 56 (︱X－T︱/T)×56分、 相对误差≥20%扣56分