血清淀粉酶操作程序.docxVIP

血清淀粉酶操作程序1.目的规范血清淀粉酶(AMY)检测试验，确保检测结果准确性和重复性。2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。3.术语4．测定原理本试剂基于IFCC推荐的方法，采用亚乙基-pNP-G7(E-pNP-G7)为底物，防止外酶分解。其反应原理如下α-淀粉酶5E-pNP-G7 + 5 H2O E-G3 + pNP-G4 +2 E-G4 +2 pNP-G3 +2 E-G5 +2 pNP-G2α-葡糖苷酶pNP-G4 +2 pNP-G3 +2 pNP-G2 +14 H2O 5pNP +14G式中：G为葡萄糖 pNP为对硝基酚在上述反应中，对硝基酚的生成速率与样本中α-淀粉酶活力成正比，通过在410nm波长处测定吸光度的上升速率，即可测得样本中α-淀粉酶的活力。5.　标本采集与处理5.1标本类型：标本最好不要溶血。留取标本后请尽快分离血清/血浆。5.2标本稳定性：血清标本在室温下保存可稳定7天，在4℃或-20℃可稳定1个月。6.　试剂6.1试剂：本科使用上海复星长征医学科学有限公司试剂盒，即用式液体试剂。试剂内主要成分如下：试剂主要成分实验浓度RE-pNP-G7型（Thio-NAD）α-葡糖苷酶 氯化钠缓冲液 1.1mmol/L 3500U/L 50 mmol/L 50 mmol/L 规格: 4×30ml6．2试剂准备试剂为液体单试剂，开瓶即可使用。6．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。7.仪器参数设定AU2700参数设定：长征试剂仪器参数具体参加试剂厂家提供的相应仪器的参数说明书.8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。8.1.2仪器经过大保养后。8.1.3挪动仪器的安装地点。8.1.4更换试剂批号。8.1.5室内质控失控。8．2 AU2700长征试剂系统的校准：8.2.1准备：长征配套校准物.8.2.2保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期。 8.2.3保存位置：2号冰箱。8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的相应位置放定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控品(批号:45612/45613)。9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。9．3质控规则：见生化室内质量控制程序。9．4失控纠正：见室内质控失控记录本10．临床标本测定：按生化标本检测程序进行。11．性能指标可报告范围5～2000Ｕ/Ｌ；不精密度≤5%；不准确度允许范围：靶值±10%。12．方法的有限性12.1试剂的抗干扰能力血红蛋白在5000mg/L以下、结合胆红素在286μmol/L （16.7mg/L）以下、游离胆红素在265μmol/L （15.5mg/L）以下，脂血在630nm波长处的吸收度在1.18以下时无干扰。13.参考值:35～140U/L。14.　临床意义： 增高见于急性胰腺炎。胰腺炎在发病8～12h血清淀粉酶开始升高，12～24h达高峰，2～5天内下降致正常，但淀粉酶增高与胰腺炎的病情轻重不一定成正比，轻症胰腺炎淀粉酶活力增高不明显或呈短暂性增高（几小时内），可造成诊断困难。此外，胰腺外伤、胰腺癌、胆管阻塞、流行性腮腺炎等亦可增高。临床上，血液淀粉酶测定在110 U/L以下，一般情况下可除外急性胰腺炎的可能。消化道穿孔、流行性腮腺炎、严重的肾病时可在参考范围的上限或略高；若测定值200 U/L时，同时临床表现和其它实验室检查也符合即可确诊为急性胰腺炎。降低见于肝硬化、肝癌及个别坏死性胰腺炎。若血液淀粉酶50 U/L以及伴有明显胰腺炎症状时，应考虑广泛性胰腺损害或有明显的胰腺功能不全。已确诊胰腺病变者则提示有严重的预后不良。15．标本外送及处理步骤：暂无16.相关文件16.1 AU2700操作程序16.2 临床生化试剂管理程序16.3 临床生化标本采集程序16.4临床生化标本检测程序16.5全自动生化分析仪校准程序16.6临床生化室内质量控制程序17.相关记录17.1临床生化室内质控失控记录表17.2临床生化试剂更换记录表17.3临床生化校准记录表