人血管内皮细胞生长因子（VEGF）酶联免疫分析（ELISA）资料.PDFVIP

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关 液体样本中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平。用纯化的 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依 次加入VEGF，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻 底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的VEGF 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光 度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48 ） 2 片（96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：900pg/ml 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×20 倍）×1 瓶 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分 钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 1 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS ，PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS