细胞凋亡线粒体调节途径在大鼠肾缺血后处理肾保护中的作用.pdfVIP

、t 1801686 目 录 OOAOO……………………………………………1 中文摘要…………………O OOOOOOOOO00………………………………3 英文摘要…………………………D 研究论文细胞凋亡线粒体调节途径在大鼠肾缺血后处理肾保护中的 作用 前言……………………………………………………………………5刖吾“”…””一“”“…一…”一”……””“”……一”””…一“”一””一b 材料与方法……………………………………………………………5 O OOO00 OOOOODOO…···………·······……0 结果………···O 6…·····………····12 附图····…············………………···…···…···…··…·…·······…·…13 讨论………···…··……····…······…OOOOOO··………·····…······……··26 OOOOO··…···…·…···…···…·…·····……···…····……··……27 结j沧……O 参考文献………………………………………………………………27 综述缺血后处理与线粒体通透性转运孔………………………………31 致谢·····…·……·…·····……··…···…···…·····…········…·…·…·……···43 个人简历……………………………………………………………………44 ～ 中文摘要 细胞凋亡线粒体调节途径在大鼠肾 缺血后处理肾保护中的作用 摘 要 目的：观察大鼠肾缺血后处理肾小管上皮细胞线粒体ATP敏感性钾通 道的变化及其对线粒体通透性转运孔的影响，探讨细胞凋亡线粒体调节途 径在大鼠肾缺血后处理肾保护中的作用。 方法：35只雄性SD大鼠随机分为5组(n=7)：假手术组(S组)，缺 血再灌注组(I／R组)，缺血后处理组(IPo组)，缺血再灌注加5-HD组 (I／R+5．HD组)，缺血后处理加5。HD组(IPo+5．HD组)。 10％水合氯醛3ml／kg腹腔注射麻醉，采用夹闭双侧肾蒂45min、再灌 注6h带lJ备肾脏缺血再灌注损伤模型。用无损伤动脉夹夹闭双侧肾蒂，肾脏 颜色变为暗红色即可确认肾脏血流阻断，造成双侧肾缺血45min，松开动 脉夹，肾脏由暗红色恢复鲜红色即可确认血流恢复，夹闭和放开肾蒂时腹 腔内各注射林格液20ml／kg。S组仅行开腹，游离出双侧肾脏，分离双侧肾 蒂不夹闭，伤口用生理盐水纱布覆盖，暴露45min不作肾缺血处理，与 IPo+5．HD组相同时刻腹腔注入等体积的生理盐水：I／R组夹闭双侧肾蒂， 0S， 缺血45min后放开动脉夹；IPo组夹闭双侧肾蒂缺血45min后，再灌注1 缺血10s，反复3次，再恢复血液灌注6h；I瓜+5．HD组缺血前30min腹腔注 5-HD(10mg／kg)，余操作同IPo组。再灌注6h时处死大鼠。 酶法测定血清肌酐(Cr)含量，苦昧酸不除蛋白法测定血清尿素氮 (BUN)含量；用激光共聚焦显微镜与相应试剂分别检测线粒体荧光强 度、线粒体膜电位、细胞中活性氧活性物质(ROS)水平、细胞内钙离子浓 度，拍照并用ImageJ软件处理图像；原位末端脱氧核苷酸转移酶标记 (TUNEL)法检测肾小管上皮凋亡细胞，计算细胞凋亡指数(触)。 组含量均升高，差异具有统计学意义(Po．05)；与I