海参肠中溶菌酶分离纯化的工艺研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 专门作用于细菌细胞壁的骨架物质一肽聚糖，广泛存 生动物、昆虫和各种微生物中。溶菌酶本身是一种蛋 、生物学中得到了广泛的应用。商品溶菌酶多由蛋清 ，限制了其应用范围，近年来国内外对多种来源的溶 洋生物溶菌酶的研究报道较少。本文对一种新型海洋 进行了研究，为海洋生物溶菌酶的进一步研究和应用 菌酶，并测定其酶学性质及抑菌作用。首先在4C下 将海参湿肠打浆，用Tris．HCI缓冲液抽提得到含有溶菌酶的上清液。上清液经浊点萃取 G．75凝胶过滤层析 法(CPE)浓缩、透析、阳离子交换柱(CM52纤维素)层析和Sephadex 分步纯化，最后得到电泳纯的溶菌酶制剂。 实验结果表明，海参肠溶菌酶经CM52纤维素阳离子交换柱层析纯化效果最为明显， G．75凝胶过滤层析柱层析纯化海 纯度提高了11．3倍，去除了大部分杂蛋白。经Sephadex 倍，活力回收为46．O％。 最后对纯化的溶菌酶性质研究表明，该酶分子量约为16kD，对溶壁微球菌的最适作 与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性。实验证明，与通常从蛋清中提取的溶菌酶 相比较，从海参中分离纯化的溶菌酶具有广谱杀菌功能，即对常见的革兰氏阴性菌和阳 性菌细胞壁均有溶解作用。 - 关键词：海洋生物，溶菌酶，浊点萃取，分离纯化，理化性质 I ● Abstract ———————————————————————————————————————————————————————————————————一一 Abstract called cellwall Lysozyme，also functionto hydrolase，specially materialofcell in tissuesand wall，exists secretionfor many as isakind of been well勰microorganism．Lysozyme usedinfood． protein，has widely medicineand for its commercial biologysafety．The