河北省规模化猪场JEV毒株的分享鉴定及进化分析.pdfVIP

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河北省规模化猪场JEV毒株的分享鉴定及进化分析论文

\删 目 录 摘要…………………………………………………………………………………………………………………………………..I ABSl凰~CT……………………………………………………………………………………………………………………….III 第一章文献综述……………………………………………………………………………………l 1流行性乙型脑炎概述…………………………………………………………………………..1 1.1乙型脑炎的流行概况……………………………………………………………………….1 1.2流行性乙型脑炎的危害…………………………………………………………………….2 1.3JEV的生物学及理化特性……………………………………………………………………3 1.4乙型脑炎的致病机理……………………………………………………………………….5 1.5乙型脑炎的流行病学研究进展…………………………………………………………….6 1.6乙型脑炎诊断方法研究进展……………………………………………………………….7 1.7乙型脑炎的防控及乙脑疫苗………………………………………………………………lO 第二章引言………………………………………………………………………………………12 l目的和意义……………………………………………………………………………………12 2研究内容………………………………………………………………………………………12 2.1JEV的分离鉴定……………………………………………………………………………13 2.2河南规模化种猪场JEV新分离株E、M基因进化分析………………………………一13 第三章JEV的分离鉴定…………………………………………………………………………。14 l弓I言……………………………………………………………………………………………………………………………14 2材料与方法…………………………………………………………………………………….14 2.1病料、毒株及细胞…………………………………………………………………………14 2.2载体及实验动物………………………………………………。 2.3仪器及试剂…………………………………………………………………………………14 2.4精液样品的采集及处理……………………………………………………………………15 2.5RT-PCR法鉴定病毒……………………………………………………………………….16 2.6乳鼠攻毒实验及RT-PCR鉴定……………………………………………………………18 2.7攻毒样品细胞盲传及间接免疫荧光鉴定实验……………………………………………19 2.8分离毒株的细胞增殖及效价测定…………………………………………………………20 3结果及分析……………………………………………………………………………………20 3.1精液样品RT-PCR结果……………………………………………………………………20 3.2乳鼠攻毒实验及RT-PCR结果…………………………………二………………………。2l 3.3攻毒样品细胞盲传及间接免疫荧光鉴定实验结果………………………………………23 3.4分离毒株的体外培养及病毒增殖实验结果………………………………………………24 4d、结………………………………………………………………………………………………………………………………24 第四章河南规模化种猪场JEV新分离株E、M基因进化分析……………………………….25 l引言…………………………………………………………………………………………….25 2材料和方法………………………………………………………………………………………25 2.1毒株………………………………………………………………………………………………………………………25 2.2生物学分析应用软件………………………………………………………………………26 2.4分离株与参考株核苷酸与氨基酸序列比对………………………………………………27 3实验结果与分析………………………………………………………………………………27 3.1分离株BSEZZ.1和BSEZZ.3M、E基

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