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第42卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第3期 2014年3月 ChineseJournalof Analytical 337～342 Chemistry 两种重组抗CD20人源化单克隆抗体定量分析方法的比较 及其在药代动力学研究中的应用 邓承莲1，2 邹佳2 欧伦2 董立厚2 宋海峰袍 1(广西医科大学，南宁530002) 2(军事医学科学院放射与辐射医学研究所，军事医学科学院药代动力学重点实验室，北京l00850) 证结果表明，两种方法均具有良好的特异性、精密度和准确度，但定量范围存在明显差异。ELISA法批内和批 间精密度均小于19．5％，准确度为一18．2％～17．6％；FCA法批内和批间精密度均小于19．O％，准确度为 一18．9％一18．4％。二者定量范围分别为0．04～5．0 mg／L和3．1—200mg／L，ELISA法的灵敏度显著高于 (PK)分析。结果表明，在给定剂量下，通过两种方法获得的PK结果具有良好的一致性。FCA法是一种细胞 表面抗原靶向性抗体类药物PK研究及药效动力学(PD)研究的快捷、理想的方法。 关键词抗CD20单克隆抗体；人源化；ELISA；流式细胞术；药代动力学 1 引 言 疫微孔板的配体结合分析(Ligandbinding immu． nosorbent assay，ELISA)、放射免疫分析(Radioimmunoassay，RIA)等¨．2J。此外，基于免疫相关技术的表 3 面等离子谐振(Surface resonance，SPR)L plasmon ECL)¨’61等定量分析方法也在快速发展。在免疫分析方法中，通常需要精制的抗原以及特异性的单克 隆抗体用于生物基质中被分析物的捕获与检测。但面对各种层出不穷的新型抗体药物，商品化的特异 立乃至整个PK／TK研究的瓶颈。在此情况下，不依赖于精制抗原或特异性抗体的分析方法如流式细胞 术(Flow eytometry 这些方法的适用性及通用性尚有待于进一步考证。本研究建立了基于FCA的抗体药物定量分析方法，并 对其方法学以及在PK研究中的应用进行了考察。同时，对FCA法与经典的ELISA法进行了系统的比较。 试图对FCA法定量分析抗体药物的方法提供较全面的评估，为后续该类药物的研究提供实验依据。 (30 mg／kg)后的药代动力学生物样品进行了分析。试图研究和对比不同分析方法测得的药物PK行为 的异同，为抗体药物PK的深入研究奠定基础。 2013-07-01收稿；2013—11-10接受 2012z1-007)资助项目 }E—mail：Songhf@vip．163．corn 万方数据 338 分析化学 第42卷 2 实验部分 2．1仪器与试剂 Guava微毛细管分析仪(Easycyte 微量振荡器(国华电器有限公司)；超净工作台(东联哈尔仪器制造有限公司)；微量加样器(德国Brand 公司)；4MK2洗板机(美国Thermo公司)；MK3酶标仪(美国Thermo公司)。 抗利妥昔单抗抗体(AbD (Abcam公司，批号：ab37355)；Wil2．S细胞由本实验室保存。 2．2药代动力学实验 h滴注
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