高效毛细管电泳法测定生药当归中阿魏酸的含量.pdfVIP

第27卷 分析化学 (FEPTXIHUAXUE)研究简报 第 12期 199!)年 12月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 1424~1427 高效毛细管电泳法测定生药当归中阿魏酸的含量 陈 勇 ‘程智勇 韩凤梅 杨 新 (湖北大学生命科学学院，武汉430062) 摘 要 阿魏酸在溶剂中不稳定，这给定量分析带来一定干扰。研究了阿魏酸在6种不同溶 剂系统中的稳定性，改进了溶解阿魏酸的溶剂，在此基础上建立了生药当归中阿魏酸的高效 毛细管区带电泳分离分析方法。电泳条件:以60mmoh/L硼砂(声9.45)为电泳介质，未涂层 弹性融硅毛细管(50mEx39.5cm，有效分离长度34.8cm)为分离通道，压力进样(68.95kPa- s),20kV恒压电泳(250C),检测波长314ran。实验发现，在4mg/L--400mg/L范围内，阿魏酸 可进行定量分析，加样回收率为100.411.2%。方法简便快速、结果准确，重现性好，可用于 当归及其制剂的质量控制。 关健词 高效毛细管电泳，阿魏酸，紫外分光光度法，稳定性 1 引 言 生药当归(RadixAngelicaeSinensis(Danggui))为伞形科植物当归(AngelicaSinensis(Oliv.) Diels)的干燥根，是著名的活血补血药。阿魏酸(Feurlicacid)是其主要有效成分之一，具有抗氧 化和自由基作用，能有效抑制血小板聚集和血栓形成，用于治疗血管栓塞性脉管炎，急性脑血 栓和偏头痛及动脉粥状硬化等症，因而其含量的准确测定具有重要意义。文献报道(1-4〕阿魏 酸在溶剂中稳定性差，见光时更易分解，影响了阿魏酸定量分析的的精密度和准确度。本文研 究了阿魏酸在6种不同溶剂中的稳定性差异，在此基础上改进了阿魏酸提取剂，用高效毛细管 电泳法(HPCE)分析测定其在当归中的含量，与文献报道的方法5-〔6〕相比具有简便、快速、微 量、价廉，线性范围宽，灵敏度高等特点，为准确控制当归药材及其制剂质量提供了新的实验手 段。 2 实验部分 2.1仪器和试剂 Bio-FocuST300)(型高效毛细管电泳系统(美国Bio-Rad公司);未涂层弹性融硅毛细管柱 (河北永年光导纤维厂);日本岛津UV-1601型紫外分光光度计;REXpHS-3C型精密声计(上 海雷磁仪器厂);JY92-II型超声细胞粉碎机(宁波新芝科器研究所);HANGPNIGFA1004电子天 平(上海天平仪器厂)。 阿魏酸(反式)对照品(上海试剂一厂);对硝基苯甲酸(北京昌平石鹰化工厂，分析纯);硼 砂(长沙有机试剂厂，分析纯);当归药材(甘肃)，由本院植化室傅运生副教授鉴定;其它试剂均 为分析纯，水为重蒸水。 2.2 电泳条件 以60mmol/L硼砂(pH9.45)为电泳介质，未涂层弹性融硅毛细管(50funx39.5cm，有效 1999-01-12收稿;1999-04-19接受。 本文系湖北省生物化学与分子生物学省级重点学科基金和湖北省教委基金资助项目。 第 12期 陈 勇等:高效毛细管电泳法测定生药当归中阿魏酸的含量 1425 分离长度34.8cm)为分离通道，压力进样(69kPas)，25℃下20kV电泳分离，314nm检测。毛 细管柱使用前用0.10MOUML的NaOH、重蒸水和电泳介质分别冲洗5min,3min,5min，每次电 泳后用电泳介质洗柱2min. 2.3 样品的制备 取当归药材约10g，粉碎后研细，50℃烘干至恒重，精密称取2.0041g，用20mL甲醇:水: 冰乙酸(18:1:1,V/V)超声提取10min(功率150w)，冷却后离心20min(3000r/min)取上清液， 残渣再分别用20mL上述溶剂重复提取两次(时间分别为6min,4min)，合并3次所得上清液 并减压浓缩至干，用提取剂溶解定容至5.0mL,0.45fun滤膜滤过，得样品A;所剩残渣用提取 剂同前法进行处理，得样品A,。另取当归药材细粉约2g两份，同法处理，得样品B,C及样品 B,、C,。 3 结果与讨论 3.1阿魏酸的稳定性考察