鸟分枝杆菌的分离鉴定及其基因组文库构建.pdfVIP

60 生 物 技 术 2014 年24 (4) 鸟分枝杆菌的分离鉴定及其基因组文库构建 * ， ， 姚奇 王爱妍 凌敏 ( ， 530021) 广西医科大学生物化学与分子生物学教研室 广西南宁 : : 。 : 16S rＲNA 15 HIV / AIDS 摘要 目的 构建鸟分枝杆菌基因组文库 方法 利用 基因测序法对 例 患者痰分枝杆菌培养阳性标 ， 。 DNA pUC19 Sau3A Bam H ， 本进行菌种鉴定 分离出鸟分枝杆菌 鸟分枝杆菌基因组 和 载体经同尾酶 Ⅰ和 Ⅰ分别酶切后连接 JM109 。 、 。 :15 连接产物转化大肠杆菌 而获得文库 通过计算文库滴度 酶切分析克隆子来评价文库质量 结果 株分枝杆菌经鉴 ， 9 、4 2 。 2. 58 × 105 cfu / ml 。 定 有 株结核分枝杆菌 株鸟分枝杆菌和 株脓肿分枝杆菌 所构建鸟分枝杆菌基因组文库滴度为 随机 9 Bam H ， 0. 5kb ～ 1kb 。 : HIV / AIDS 挑选 个克隆进行 Ⅰ酶切分析 可见到插入片段大小约在 之间 结论 从 患者中分离出鸟分枝杆 ， ， 。 菌 并成功构建了鸟分枝杆菌基因组文库 为研究鸟分枝杆菌致病基因的结构和功能提供了基础 : ; ; 关键词 鸟分枝杆菌 分离鉴定 基因组文库 中图分类号:Q786 文献标识码:A doi :10 ． 3969 /j ． issn． 1004 － 311X． 20 14 ． 04 ． 0089 Isolation and Identification of My cobacterium avium and Its Genomic Library Construction * YAO Qi ，WANG Ai － yan ，LING Min (Department of Bio