栉孔扇贝.pptVIP

三倍体贝类具有不育性，在生长过程中只有少量能量用于性腺发育，更多的能量用于生长，因而表现出生长快，个体大，出肉率高的优势，可增加产量，提高品质并降低死亡率的优点 一、栉孔扇贝三倍体的诱导方法对于鱼类来说，由于其卵子的第一次成熟分裂是在卵巢腔中完成的，因此只能通过阻止其第二极体的放出，和鱼类不同，贝类是在受精之后完成两次成熟分裂，所以无论阻止第一极体还是第二极体的放出都可以形成三倍体。 但是栉孔扇贝通过抑制第一极体途径获得的三倍体，虽然具有较高的杂合度和明显的生长优势（Standy et al ,1984）然而，由于染色体在第二次成熟分裂的过程中分离的复杂化，三倍体率，胚胎的孵化率和幼虫的成活率都很低，不适合大规模生产。因此，目前栉孔扇贝三倍体多采用抑制第二极体的方法 1、物理方法温度休克法：有热休克和冷休克2、化学方法常用的化学药品有：细胞松弛素B（简称CB）、6—二甲氨基嘌呤（6—DMAP）6—DMAP主要作用是通过对磷酸化激酶的抑制，抑制一系列有磷酸激酶参与的生化反应和细胞功能，如抑制极体的形成和释放等。 由于6-DMAP低毒、高效、廉价，处理后不需洗卵去除药液可直接入孵化池孵化，孵化率达70%左右，幼虫发育及存活率与二倍体组无明显差异，所以在贝类诱导多倍体中代替CB被广泛应用。 二、适宜的诱导参数使用6—DMAP 诱导栉孔扇贝三倍体影响三倍体率和成活率主要因素有：起始处理时间、药物浓度、和持续处理时间等。水温17℃，受精后14min个别出现第一极体，25min第一极体占40%，33min第一极体占70%达到最大值，此时个别出现第二极体从第一极体开始出现至达到最大值相差19min. 实验结果表明，处理时机的选择对三倍体率和D形幼虫成活率有显著影响。受精后25min可获得较高的三倍体率和D形幼虫成活率，但是，在实验条件相同的情况下，采用相同的起始处理时间，在不同的批次实验中也会得到不同的三倍体率和成活率，主要是因为不同批次卵子的发育进程有所差异造成的。（同批次，受精卵发育的不同步性）因此起始处理时间并不是孤立的确定而应以受精卵发育的生物学时间，即第一极体出现的百分率较为准确（一般为40%） 三、栉孔扇贝染色体倍性检测方法主要有：染色体分析法 、细胞流式计检测法、荧光显微分析法四、应用实例亲贝选择、暂养1、采卵准备工作 2、产卵 3、卵子收集 4、精子收集 5、受精（精卵比不少于100:1）6、二次积卵（受精后约15min，用500网目兜浓缩冲洗放在药物处理槽内，控制在16.6L） 7、药物处理卵子受精后约25min,当第一极体占40%左右时，加入1g6—DMAP进行药物处理，处理过程中要不断搅动，保证药物作用均匀。药物处理时间为15min 8、孵化 9、三倍体幼体培育 10、中间暂养 11、栉孔扇贝三倍体的养成 * * 栉孔扇贝的 三倍体技术目前我国扇贝养殖产量的提高主要是依靠养殖规模的扩大和人力、物力的大量投入。随着养殖面积和养殖密度的不断增大以及生态环境的改变，养殖个体小型化、死亡率增加、大面积死亡现象时有发生。究其主要原因与种质退化有关，因此生长快、品质好、抗逆能力强的扇贝是目前迫切需要的