胰岛素对肺泡上皮细胞钠离子通道仅亚基的调控研究.PDF

CritCare 2010，V01．22，No．7 ·385· Med，July 生垦危重病急救医学2010年7月第z2卷第7期Chin ·论著· 胰岛素对肺泡上皮细胞钠离子通道仅亚基的调控研究 张维王导新 【摘要】 目的研究胰岛素作用下肺泡上皮细胞钠离子通道a亚基(ENaC—a)的变化及其对细胞凋亡的 影响。方法 以人肺腺癌细胞株A549为对象，用含30U／L的胰岛素培养基培养30rain和60min，分别用蛋 白质免疫印迹法(Western blotting)和逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)法测定ENaC—a及血清和糖皮质激素 诱导的蛋白激酶1(SGK一1)的蛋白及mRNA表达，并使用白屈菜红碱阻断蛋白激酶C(PKC)抑制SGK一1后 再次测定ENaC—a蛋白表达。用原位末端缺刻标记法(TUNEL)测定经胰岛素处理后的A549细胞凋亡率。结 果 min即可明显上调ENaC—a和SGK一1的蛋白及mRNA表达，并随处理时间延长表达量 用胰岛素培养30 min时ENaC—a、SGK一1蛋 明显增加。若以未添加胰岛紊培养A549细胞蛋白表达量为100％，胰岛素作用30 白表达量为124％、135％，60min时ENaC—a、SGK一1蛋白表达量为186％、176％(均P0．05)。胰岛素还可以 抑制缺氧诱导的A549细胞凋亡(10．3％比21．6％，P0．05)。结论胰岛素可以通过PKC、SGK一1途径上调 ENaC—a表达，并抑制缺氧诱导的A549细胞凋亡，从而有利于急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征(ALI／ ARDS)的预后。 【关键词】胰岛素；钠离子通道a亚基；急性肺损伤； 急性呼吸窘迫综合征； 血清和糖皮质激素 诱导的蛋白激酶1 of effectofinsulinon of sodiumchannelasubunitinA549cells Studyregulatory expressionepithelial Second ZHANGWei。WANGDao—xin．The of Affiliated of RespiratoryDepartment HospitalChongqing Medical 40001 0，China University，Chongqing 63．com author：WANG j@1 Corresponding Dao—xin，Email：wangdaoxin Toobservetheeffectsofinsulinonthe of sodiumchannela [Abstract]Objective expressionepithelial its subunit(ENaC—a)inhuman adenocarcinomaeellline(A549cells)and on of pulmonary impactapoptosis the cellswereculturedwithinsulininaconcentrationof30U／Lfor30minutesor cells．MethodsA549 60minutes．ThenENaC—q．serumand