中药新药临床前毒理学评价ppt.pptVIP

急性毒性试验 基本原则: 执行GLP 具体问题具体分析 随机、对照、重复 动物: 获得尽量多信息前提下，使用尽量少动物 啮齿类---小鼠或大鼠 非啮齿类---犬或猴 二种动物(啮齿类及非啮齿类) 小鼠18-22g; 大鼠120-150g; 犬用成年犬 初始体重不应超过或低于平均体重的20% ♀♂各半 急性毒性试验 受试物: 工艺稳定、符合临床用质量标准 标明名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等，附质检报告 辅料、溶剂、试剂等应标明批号、规格和生产厂家，符合试验要求 ? 例如： 原料药 临床拟用剂型 复方制剂：复方 + 拆方 (增毒？新毒？) 易降解：含降解产物量最高的受试物进行急毒试验，并与临床样品的急毒试验结果比较 急性毒性试验 给药途径： 临床拟用途径 + 原型药物较完全进入循环途径（如静脉注射） 啮齿类ig给药前应禁食12h，不禁水 剂量和分组 给药剂量：未见毒性量?严重毒性量 设空白和/或溶媒（辅料）对照 小动物4-6个剂量组, 组距0.65-0.85,求LD50 大动物可用50%等量递升法(近似致死剂量法), 求出ALD和MTD，不必达到致死量 急性毒性试验 给药容积：不等浓度等容量给药 动物 给药途径 给药量 小鼠 ig 0.2-1.0 ml/10g iv、ip、sc 0.1-0.5 ml/10g 大鼠 ig 1.0-2.0 ml/100g iv、ip、sc 0.5-1.0 ml/100g 静脉注射(iv)；腹腔注射(ip)；口服(po)；皮下注射(sc)；灌胃(ig) 急性毒性试验 观察指标及时间 药后4h内详观, 后每天上下午各一,观察≥14d 记录毒性反应、死亡情况, 中毒症状、发生时间、持续时间、严重程度、恢复期及动物最短、最长死亡时间 其它指标：一般指标、体重变化等 急性毒性试验 急性毒性研究的一般观察和指征 观 察 可能涉及的器官、组织、系统 Ⅰ. 鼻孔呼吸阻塞，呼吸频率和深度改变，体表颜色改变 CNS，感官，神经肌肉等 Ⅱ.运动功能：运动频率和特点的改变 CNS，感官，神经肌肉等 Ⅲ.惊厥(抽搐)：随意肌明显的无意识收缩或惊厥性收缩 CNS,呼吸衰竭,神经肌肉,自主神经 Ⅳ.反射 感官，神经肌肉 Ⅴ.眼检指征 自主神经；出血，感染 Ⅵ.心血管指征 自主神经,CNS,心输出量降低等 Ⅶ.唾液分泌 自主神经 Ⅷ.竖毛 自主神经 Ⅸ.痛觉丧失 感官，CNS Ⅹ.肌张力 自主神经等 Ⅺ.胃肠指征 自主神经，胃肠动力等 Ⅻ.皮肤 刺激性，炎症，过敏等 急性毒性试验 结果处理：实验资料用Bliss法计算LD50。必要时求不同性别LD50 剂量－反应、时间－反应关系 反应可能涉及组织、器官或系统 肉眼病变和组织病检，初步判断毒性靶器官 病检报告应附：病检者签名+单位盖章+病理照片 确定NOAEL、 MTD、ALD etc，初步判断受试物的安全范围 急性毒性试验 综合评价 判断反应与药物作用相关性： 时间、发生率、剂量-反应关系 动物种属及背景数据 病理学检查结果 同类药物特点 安全范围、毒性严重程度及可恢复性 毒性作用靶器官 毒性可能涉及部位 大体解剖和组织病理学检查结果 长期毒性试验 第一阶段 （1）两种品系、35天染毒、毒性量效曲线，推荐临床使用途径； （2）器官毒性试验、死亡情况、体重变化、血液学、临床生化学、组织学检查； （3）致突变活性第二阶段筛选； （4）生殖毒性试验； （5）受试动物的药代动力学研究； （6）行为试验； （7）协同、增效、拮抗作用。 长期毒性试验 第二阶段 （1）动物长期毒性试验（半年以上）； （2）哺乳类动物致突变试验； （3）啮齿类动物2年至癌试验； （4）人类药代动力学试验； （5）人类临床试验； （6）短期和长期用药的流行病学资料。 长期毒性试验 基本原则 执行GLP 整体性 研究结果与其它药理毒理试验互为印证、说明和补充 具体问题具体分析 随机、对照、重复 长期毒性试验 动物 in vitro体系筛选实验动物种属或品系 理想动物 对受试物生物转化与人体相近 对受试物敏感 已有大量历史对照数据 二种动物，啮齿类首选大鼠，非啮齿类用Beagle犬, 必要时用猴、猪等 符合等级要求 来源、品系、遗传背景清楚，有动物质量合格证 大鼠6-9 w， Beagle犬6-12 m,体重CV≤20％ ♂♀各半 必要时，可用疾病模型动物进行试验 Duration ≥6m, natural death ( rat: 1y-15%, 1.5y-50%, 2y-70-80%) 长期毒性试验 给药途径 与临床用药途径一致 临床iv , 大鼠给药＞1月，ip代替 im或sc应变换注射部位 必要时改变给药