b溶血性贫血的实验室检查ppt课件.pptVIP

（二）氰化物-抗坏血酸盐试验 原理: 6-磷酸葡萄糖 NADP GSH H202 氧合血红蛋白 6-磷酸葡萄糖酸 NADPH GSSG H20 高铁血红蛋白 结果:正常人标本呈红色 临床意义: 1.纯合子G6PD缺乏经1-3h温育后,变为棕色 2. 杂合子标本3-4h变成棕红色 G-6PD （三）变性珠蛋白小体生成试验 又称“红细胞包涵体”、 “赫恩小体”、 “Heinz小体”、 “海因小体” 原理：G-6PD缺乏及不稳定Hb病患者 Hb易被氧化，其珠蛋白变性沉着于红细胞膜上。 抗凝血 +乙酰苯肼 37℃温育2～4h 充分的氧化 其Hb氧化成Heinz小体（用结晶紫、甲紫或煌焦油兰染色，油镜观察）　　　　 1. 正常人 ＜30% 2. G6P缺陷症、不稳定Hb、HbH病等常高于45% 结果： 该小体为圆形或多角形色涵体，φ0.2～2um。 多位于红细胞边缘，一个红细胞含1～20个，多为1～2个，以含5个以上小体的红细胞计数 （四）G6PD荧光斑点试验和活性测定 原理: G6PD 使NADP还原成NADPH, 后者在紫外线照射下发出荧光 参考值： 正常人强荧光； 酶活性 5 U/gHb 6-磷酸葡萄糖 NADP GSH H202 氧合血红蛋白 6-磷酸葡萄糖酸 NADPH GSSG H20 高铁血红蛋白 G-6PD 三、珠蛋白合成异常的检测 血红蛋白的结构 原卟啉 血红素 Hb（四聚体） 铁 2条α链 珠蛋白：由4条多肽链组成 2条非α链 正常人 HbA（?2?2） 97% HbA2（?2?2）1.5-3% HbF（?2 ?2） 0.5-0.8% 血红蛋白病 珠蛋白肽链量的不正常(地中海贫血) 血红蛋白分子结构异常(异常血红蛋白病) 遗传性溶血性疾病 (一) 血红蛋白电泳 蛋白质的两性性质—是由氨基酸的NH+与COO- 决定的。 等电点—调节水溶液的pH，能使蛋白质的NH+与COO- 数目相等呈电中性， 此时蛋白质无电泳，在水中电解度小，并发生沉淀。 电泳：一个带电荷的离子或胶体颗粒在电场中可向一极移动。 原理：在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb等电点，其带负电，在电场中向阳极移动；反之向阴极移动。 由于各种Hb珠蛋白肽链结构不同，其等电点不同，电泳方向和速度亦不同，故可分离出不同的区带，对区带进行电泳扫描，可进行Hb定量分析。 (+) H J K A G D E (-) 1. HbH增多是HbH病，为α-地中海贫血的一种；HbA2明显增高见于轻型β地中海贫血；HbF 明显增高见于中重型β地中海贫血。 2. 正常值：醋纤法（PH8.6）HbA 96%~98% ，HbA2 1.0%~3.1% ， HbF＜2% 电 泳 结 果 CA A2 F A 异常 正常 （二） HbF （?2 ?2）酸洗脱试验： 含HbF红细胞着色 （三）HbF定量测定（碱变性试验）: 2岁-成人 HbF2%，4%为异常， 重型 ?地贫30-90%， 遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合症100% （四）HbA2定量测定 诊断轻型?地贫的重要依据 （五）限制性内切酶谱分析 四、自身免疫性溶血性贫血检验 自身免疫性溶血性贫血 （autoimmune hemolytic anemia,AIHA)