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⑷按氨基酸是否能在人体内合成分(重点掌握) : ①必需氨基酸:指人体内不能合成的氨基酸,必须从食物中摄取,有八种:赖氨酸、色氨酸、甲硫(蛋)氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸。 (苏缬亮异亮, 苯丙色赖蛋) ②非必需氨基酸:指人体内可以合成的氨基酸。有十余种。 ③半必需氨基酸:指人体内可以合成但合成量不能满足人体需要(特别是婴幼儿时期)的氨基酸,有两种:组氨酸、精氨酸。 5. 蛋白质中不常见的氨基酸 羟-脯氨酸 (4-HyP)、羟-赖氨酸(5-HyL)、r-羧基谷氨酸、6-氮-甲基赖氨酸 6. 非蛋白氨基酸 鸟氨酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸等 鸟氨酸 瓜氨酸 三、氨基酸的理化性质 1.物理性质 ①形态:均为白色结晶或粉末,不同氨基酸的晶型结构不同。 ②溶解性:一般都溶于水,不溶或微溶于醇,不溶于丙酮,在稀酸和稀碱中溶解性好。 ③熔点:氨基酸的熔点一般都比较高,一般都大于200℃,超过熔点以上氨基酸分解产生胺和二氧化碳。 ④旋光性:除甘氨酸外的氨基酸均有旋光性(重点掌握) 。 ⑤光吸收:氨基酸在可见光范围内无光吸收,只有Trp、Tyr、Phe含有功轭双键,所以能够吸收紫外光。它们的吸收峰分别在280、275、257 (nm)。因为蛋白质一般含有Trp、Tyr、Phe,其紫外吸收峰大多数在280 nm左右(重点掌握) 。 2.化学性质 ⑴氨基酸的两性解离及等电点 氨基酸既含有氨基,可接受H+,又含有羧基,可电离出H+,所以氨基酸具有酸碱两性性质。通常情况下,氨基酸以两性离子的形式存在。 氨基酸在酸性环境中,主要以阳离子的形式存在,在碱性环境中,主要以阴离子的形式存在。这种可以在不同的pH环境下发生不同的电离方式,形成带相反电性的离子,称为两性解离,这种离子称为两性(兼性、偶极)离子。 氨基酸的等电点:氨基酸分子的净电荷为零(所带正负电荷相等)时的溶液pH,以pI表示(重点掌握) 。 氨基酸具有两性电离的性质,因而其水溶液既可被酸滴定,又可被碱滴定。现以甘氨酸为例来说明氨基酸两性电离的特点。 甘氨酸的电离酸碱滴定曲线 从左向右是用NaOH滴定的曲线,溶液的pH由小到大逐渐升高;从右向左是用盐酸滴定的曲线,溶液的pH由大到小逐渐降低。 曲线中从左向右第一个拐点是氨基酸羧基解离50%的状态,第二个拐点是氨基酸的等电点,第三个拐点是氨基酸氨基解离50%的状态 茚三酮的反应:除脯氨酸与羟脯氨酸外,可与其它氨基酸生成蓝紫色化合物。脯氨酸与羟脯氨酸为黄色化合物。 ⑵α-氨基与α-羧基共同参加的反应 ⑶α-氨基参加的反应 ①2, 4-二硝基氟苯(2, 4-DNFB)的反应(Sanger反应) :生成黄色的二硝基苯-氨基酸衍生物。 ②苯异硫氰酸酯 (PITC) 反应(Edman反应) :生成苯乙内酰硫脲-氨基酸。蛋白质自动测序仪即基于此原理。 ③丹磺酰氯(DNS-Cl) 反应:生成荧光物质DNS-氨基酸。 ①②③反应用于蛋白质的N-末端的测定 ④与甲醛的反应:用过量的中性甲醛与氨基酸反应,可游离出氢离子,然后用NaOH滴定,从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量。此法称为间接滴定法。 用途:用来直接测定氨基酸的浓度 ⑷α-羧基参加的反应: ①与碱反应成盐 ②与醇反应成酯 ③ 与酰化试剂反应成酰氯(活化氨基酸羧基) ⑸侧链反应(颜色反应): ①Millon反应:检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 Millon试剂:汞的硝酸盐与亚硝酸盐溶液。 产物:红色的化合物。 ② Folin反应:检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 Folin试剂:磷钼酸、磷钨酸混合溶液。 产物:蓝色的钼蓝、钨蓝。 ③Pauly反应:检测His、Tyr及含His、Tyr蛋白质。 试剂:对氨基苯磺酸盐酸溶液、亚硝酸钠、碳酸钠 混合溶液 产物:橘红色的化合物。 ⑤乙醛酸的反应:检测Trp或含Trp蛋白质的反应。 当Trp与乙醛酸和浓硫酸在试管中叠加时,产生分 层现象,界面出现紫色环。 ⑥Cys的反应:Cys或含Cys蛋白质与亚硝基亚铁氰 酸钠在稀氨的溶液中,产生一种红色的化合物。 ④坂口反应:检测Arg或含Arg的蛋白质的反应。 坂口试剂:α-萘酚的碱性次溴酸钠溶液。 产物:砖红色的沉淀 * * * * * * * 一、蛋白质 (Protein) 的生物学意义 1.蛋白质是生命活动的物质基础 生物体内的蛋白质是除水以外,机体组织中最多的组分,占人体干重的45%,占细菌干重的50~70%。 第一节 蛋白质通论 2.蛋白质的生物学功能 ①作为生物催化剂:在体内催化各种物质代
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