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实验七 综合实验 实验目的 1. 学习并掌握小鼠旋转杆平衡实验、跳台回避实验以及无创血压测试方法 2. 了解各个测试指标的意义 实验原理 1. 旋转杆平衡实验是测试小鼠肌肉协调性、疲劳的经典实验。实验所使用的疲劳转棒仪可用于研究药物对动作协调性和抗疲劳特性的影响。 2.跳台回避实验属一次性刺激回避反应实验，是衡量小鼠智能优劣的一种方法。通过给予小鼠厌恶刺激，观察小鼠的学习记忆能力。 3.无创血压测量通过大、小鼠尾动脉固定，通过压力感应装置检测血压变化特点，采用计算机分析可以获得动物的收缩压、舒张压及脉搏波频率变化的系列数据。 实验对象 小鼠 实验仪器 ZB-200疲劳转棒仪 STD-8 8通道大小鼠跳台实验系统 大小鼠无创血压测定系统 计算机 实验步骤 一、旋转杆平衡实验 训练阶段： 1. 将动物从饲养室转移入实验操作室，适应60min。 2. 将旋转杠的速度调至24r/min，打开旋转设置装置，置动物与旋转杆上，测定其从旋转杆上滑落的时间，即潜伏期。设定最长潜伏期为60s。 3. 每天每只动物训练4次，每次间隔5-10min，连续训练3天。 4. 训练结束后，将动物送回饲养室，以70%的乙醇清洁训练装置。 测试阶段: 将动物从饲养室转移入实验操作室，适应60min。 打开旋转设置装置，测定动物在不同旋转速度下的潜伏期，转速分别为5、8、15、20、24、31、33、44r/min。每个速度测定两次，在计算时取其平均值。 测试结束后，将动物送回饲养室，以70%的乙醇清洁训练装置。 编号 5 8 15 20 24 31 33 44 CE12 CE19 CE20 CE21 CE25 AE6 AE9 AE11 AE14 AE15 二、跳台回避实验系统 1. 打开SDT-8跳台实验视频分析系统软件，点击“打开摄像头”按钮，再打开实验箱，将其中所有的跳台全部翻面，使背面黑色的部分朝上并靠角落放置，再关闭试验箱。点击“曝光+”和“曝光-”两个按钮调节曝光强度，使软件自动识别到跳台区域，点击“区域设定”按钮。设定完毕后，将所有跳台翻面，使黑色部分朝下置放，使得区域设定后倒置跳台时将跳台卡入从右上角开始的第二根刺激棒内便能保证其放回原位置。关闭试验箱。 2.实验包括两次相隔 60min的电击训练和一次 24h 后的记忆保持实验。 ① 电击训练：将小鼠放置于跳台之上，当它往下跳至刺激栅极时，给予能够引起小鼠发声和退缩的最小电压（28V）的电击。将小鼠放回笼内，清洁箱体。1h后重复上述训练，记录跳台潜伏期。如果小鼠在跳台上的滞留时间超过60s，即认为它已经记住先前的厌恶刺激，不给电击，放回笼内；如果小鼠跳台潜伏期少于60s，则在1h后再次重复训练一次。如仍不达标，则予以淘汰。 ②记忆保持实验：在第一次训练后的24h进行。方法与训练相同，但不给电击。记录小鼠从跳台跳下的错误次数。如小鼠300s后仍不跳下跳台，则终止实验。 实验除记录错误次数外，还记录达到回避标准的动物数。达标标准为：“记忆保持测试”的潜伏期大于“第二次训练”潜伏期的3倍且超过60s。以错误反应次数为判断记忆力的定性指标，达标动物的百分比为记忆的定量指标。 编号 潜伏期 错误次数 编号 潜伏期 错误次数 CE12 AE6 CE19 AE9 CE20 AE11 CE21 AE14 CE25 AE15 三、大小鼠无创血压测试 预热无创血压测试仪，使箱体温度达到37℃ 将小鼠的四肢和头部固定住固定装置中，将加压装置和压力传感器固定在小鼠尾部，放入箱体使其适应环境 通过充气、放气对尾动脉加压和释压的同时监测血流信号，得出血压值 测量记录平均动脉压、收缩压、舒张压和心率 编号 血压 心率 编号 血压 心率 CE12 AE6 CE19 AE9 CE20 AE11 CE21 AE14 CE25 AE15 分析讨论 三种仪器各自的测试指标有哪些？这些指标可以用来反映出实验动物的何种功能？