97微生物限度检查操作规程剖析.doc

四川利君精华制药股份有限公司GMP管理文件 题 目 微生物限度检查操作规程 共16页 文件编号 JH-CZ-ZL-097-ROO 第1页 制 定 人 审 核 人 批 准 人 制定日期 审核日期 批准日期 生效日期 版 本 号 R00 颁发部门部C室、质量部负责人 颁发数量 03 文件编写历史：本次为定。适用于微生物限度检查的标准操作。C：负责执行。 3.2 QC主任：负责检查。 3.3 质量部经理：负责监督。《中国药典》2010年版二部概述微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。 四川利君精华制药股份有限公司 第2页 共16页 题目 微生物限度检查操作规程 文件编号 JH-CZ-ZL-097-ROO 版本号：00 5.1.4 检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告，特殊品种可以最小包装 单位报告。 5.2 检验量：检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm2） 5.2.1 除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；膜剂为100cm2；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照检查）。 5.2.2 检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。 5.2.3 一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。 5.3 培养基制备：按《培养基配制操作规程》进行制备。 5.4 供试液的制备：根据供试品的理化性质与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。 5.4.1 液体供试品 取供试品10ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1 ：10的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试品。 5.4.2 固体、半固体或黏稠液供试品 取供试品10g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀，作为1：10的供试液。必要时加适量无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温，使供试品分散均匀。 5.4.3 非水溶性供试品 5.4.3.1 取供试品5g（或5ml），加至含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80，3g单硬脂酸甘油酯，10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻璃棒搅拌成团后，慢慢加入45℃的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为1∶20的供试液。 5.4.3.2 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯和无菌玻璃珠的适宜容器中， 必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45℃的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇5～10分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为1：10的供试液。 四川利君精华制药股份有限公司 第3页 共16页 题目 微生物限度检查操作规程 文件编号 JH-CZ-ZL-097-ROO 版本号：00 5.4.3.3 膜剂供试品 取供试品100cm2，剪碎，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲100ml（必要时可增加稀释剂），浸泡，振摇，作为1∶10的供试液。 5.4.3.4 肠溶及结肠溶制剂供试品 取供试品10g，加PH6.8无菌磷酸盐缓冲液（用于肠溶制剂）或PH7.6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml，置45℃水浴中，振摇，使溶解，作为1:10供试液。 5.4.3.5 气雾剂，喷雾剂供试品 取规定量供试品，置冰冻室冷冻约1小时，取出，迅速消毒供试品开启部位，用无菌钢锥在该部位钻一小孔，放至室温，并轻轻转动容器，使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部药液，加至适量的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（若含非水溶液成分，加适量的无菌聚山梨酯80）中，混匀，取相当于10g或10ml的供试品，再稀释成1:10的供试液。 5.4.3.6 贴剂供试品 取规定量供试品，去掉贴剂的保护层，放置在无菌玻璃或塑料片上，粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料（如无菌纱布）覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体积并含有表面活性剂（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀释剂中，用力振摇至少30分钟，制成供试液。贴剂也可采用其他适宜的方法制备成供试液。 5.4.3.7 具抑菌活性供试品 当供试品有抑菌活性时，采用下列方法进行处理，以消除供试液的抑菌活性，再依法检查。 5.4.3.7.1 培养基稀释法 取规定