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实验四 可溶性糖含量测定 可溶性总糖的测定 人体生命 活动 葡萄干含糖量70%~80% 香蕉含糖量20% 含糖量高的食品 石榴含糖量为17% 红胡萝卜含糖量为8% 西红柿含糖量为2% 含糖低的食品 菠菜含糖量为2% 芹菜含糖量为2% 西瓜含糖量为4% 一、实验目的 二、实验原理 糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物，反应如下： 糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生绿色络合物，其在可见光区620nm波长处有最大吸收，且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。 三、实验材料、仪器及试剂 1．材料：波菜 2．仪器：分光光度计 水浴锅 试管 50ml容量瓶（2个） 试管架 加样枪 漏斗 滤纸 三角瓶 剪刀 3．试剂： （1）100μg/ml标准葡萄糖：AR级葡萄糖50mg，蒸馏水溶解，定容至500ml。 （2）蒽酮试剂：0.2g蒽酮溶于100ml浓H2SO4中当日配制使用 四、实验方法 1．葡萄糖标准曲线的制作 取7支具塞试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。 管号 1 2 3 4 5 6 7 标准葡萄糖原液（ml） (200ug/ml) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8 蒸馏水(ml) 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2 葡萄糖含量（μg） 0 10 20 30 40 60 80 在每管中均加入4ml蒽酮试剂，封上封口膜摇匀后，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的吸光强度（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光吸收值为纵坐标，作出标准曲线。 葡萄糖标准曲线的公式为： y=0.4826x+0.0003 (x葡萄糖浓度，y为OD值） 2 过滤，滤液收集于50ml容量瓶后定容 2．样品中可溶性糖的提取 吸1ml提取液(比色空白用 1ml蒸馏水)于具塞刻度试管 加4ml蒽酮试剂（注意：浓 硫酸遇水会产生大量的热） 沸水浴10分钟后取出， 冷却至室温 在波长620nm下比色， 记录吸光度 封上封口膜后，轻轻摇匀 3．糖含量测定 放入烧杯中，加水25ml 在沸水浴中加热10min 取出后冷却 吸取提取液2ml,置另一50ml容 量瓶中定容，摇匀测定 将菠菜叶剪碎，称取1g 五、结果计算 六、注意事项 加蒽酮试剂时应缓慢加入，以免产生 大量热量而爆沸，灼伤皮肤，如出现 上述情况，应迅速用自来水冲洗。 七、作业 得出实验结果后，根据标准曲线算出菠菜 的含糖量，写于实验报告上
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