荧光原位杂交技术应用于多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常检测的研究进展.pdfVIP

塞筮医堂兰Q塑堡笠三Q鲞筮!!翅叁些尘丛皇尘世』竺坚堂y竺!：垫：№：!!：丛型：兰Q塑 1357 ·综述讲座· 荧光原位杂交技术应用于多发性骨髓瘤分子 细胞遗传学异常检测的研究进展 王风云综述夏瑞祥审校 [关键词]多发性骨髓瘤；荧光原位杂交；分子细胞遗传学；异常 doi：10．3969／j．issn／1000-0399．2009．11．041 缺失是MM常见的染色体异常，在MM发病机制中较早发现是 多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，MM)是以骨髓中克隆性 浆细胞恶性增殖和异常积聚为特征的肿瘤，临床经过及预后个 该病预后及生存期预测重要指标之一。但其主要丢失部位存 体差异较大具有明显的异质性，生存期从数月至数年不等。荧 光原位杂交技术(FISH)的不断发展，大大提高了MM分子细 胞遗传学异常榆出率，为其预后提供了精确的检测平台，也为 等…采用覆盖13号染色体长臂的11种探针发现最多见的丢 指导个体化治疗奠定r基础。 1 FISH技术与常规细胞遗传学检测技术比较 荧光原位杂交技术结合了细胞遗传学、分子遗传学和免疫 学优点的一『J新技术，主要是根据碱堆配对的原理直接用荧光 标记的核酸探针与染色体上特定核酸结合直观观察荧光杂交 位点缺失。目前认为虽然一些患者存在13q14的中间小片段 信号分析是否有分子细胞遗传学异常。该技术不需要中期分 丢失，但大多数情况下是丢失整个13q或整个13号染色体。 裂相，可分析大量问期细胞和终末细胞(如淋巴细胞)。能够对 已知序列片段的变化进行高度敏感ffIi特异的检测。在中期分 裂相不易获得的多发性骨髓瘤具有更突出的优势，并能检测到 月)，但对治疗反应无影响。也有研究一1认为13号染色体长臂 与预后密切相关的累及基闪位点的微缺失，异常克隆率可显著 缺失与患者总牛存期(OS)无关，而与血清肌酐水平、血小板减 提高到80％以上¨引。常规细胞遗传学检测方法(常规G显带 少、血清母2一MG水平、高骨髓瘤细胞(30％)、贫血和疾病处 和R湿带)需要细胞培养、染色体制备和人工镜下分析，周期 在进展状态有密切关系。标准剂量甚至大剂量的化疗并不能 长、人工消耗大，而且染色体分析需要有较好质苗的中期分裂 延长13号染色体缺失的患者中位生存期(27个月比34．9个 相，由于骨髓瘤细胞为终末分化细胞，增长率较低，很难获得足 月)，改善患者的预后可能需采取积极治疗手段(减低剂量预处 够分裂相进行分析，文献报道在MM中的异常检出率仅15％一 理后的自体干细胞移植和异基因干细胞移植¨…。 30％，对疾病的预后评估作用小¨J。 2．2 14q32染色体易位检测针对14q32IgH基冈的易位包 括t(1 2 FISH技术在MM常见分子细胞遗传学中的应用 研究表明141分子细胞遗传学改变在MM发病机制中发挥 5种伙伴 重要作用，MM常涉及多种染色体异常主要为数目异常见于 基因，易位导致上述原癌基因过度表达。大量研究显示MM肿 90％以上的患者，染色体核型异常分为超二倍体和非超二倍体 瘤细胞中有一类高度表达的CyclinD基因，考虑CyclinD基因 两大类，其中超二倍体常见染色体改变是+3、+5、+7、+9、+异常表达可能是IgH易位治病的共同途径但具体机制仍未明 11、+15、+19、+2l。非超二倍体主要累及一8、一13、一14、一确。Soverini等¨¨研究发现单独CyclinD过表达并不能导致细 17、一22等。在MM染色体异常中结构改变较少见主要有l号胞进展周期进展，可能需要myc／ras的协同作用或CyclinD过 (1p、lq，部分缺失或1q三体)、13q一、14q(多为与14q32有关表达后细胞对生长活化的信号敏感性增加，对生长抑制的信号 的几种互补易位)等。常规细胞遗传学技术检出率低15％一 敏感性减弱。引起凋亡受抑、增生加快最终导致疾病的发生。 20％，FISH技术可提高至38％～54％怕j。 2．1 1