细菌形态、染色.pptVIP

微生物的分类 微生物：包括细菌、支原体、衣原体、螺旋体、放线菌、立克次体、病毒及真菌。 微生物的生物学性状包括：形态结构、染色特性、生长繁殖与培养、理化性状、分类等。 细 菌 细菌 广义——所有原核细胞型微生物（细菌、支原体衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌） 共性：有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗生素敏感 狭义——专指其中的细菌 细菌的大小与形态 观察细菌常用光学显微镜，其大小用测微尺在显微镜下进行测量，以微米(μm)为单位。不同种类的细菌大小不一，同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异。 细菌按其外形，主要有 革兰氏染色法由Gram发明，沿用至今已有100多年历史。 是临床细菌学中最简单、最重要的方法之一。 染色后把细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。 1.鉴别细菌 2.选择药物参考 G+ 菌的敏感药物：青霉素 G- 菌的敏感药物：链霉素、氯霉素 3.与致病性有关 G+ 菌的致病物质：产生外毒素 G- 菌的致病物质：产生内毒素 1.涂片 （layering a film） 2.干燥 （air-dry） 3.固定 （heat-fixing） 4.初染 （first stain） 5.媒染 （stain with iodine） 6.脱色 （decolorize） 7.复染 （ counter-stain） 第一步 涂片 临床标本和液体培养物：直接涂片 固体培养基上的细菌和不易涂开的标本：取一滴生理盐水置玻片中央，取菌在盐水中磨匀，成1cm2的涂面。 第二步 干燥 涂片最好在室温下自然干燥 或将标本面向上，置于火焰上部的热气烘干，切不可在火焰上烤干 第三步 固定 将已干燥的涂片通过火焰3次，以玻片触及手背皮肤热而不烫为度。 第四步 初染 滴结晶紫染液于玻片上，使细菌涂层被全部覆盖，1分钟后，细流水冲洗，甩干。 第五步 媒染 滴加碘液于玻片上，1分钟后，流水冲洗，甩干。 第六步 脱色 滴加95%酒精数滴于玻片上，轻轻摇动，不断补充酒精，脱色至流下来的液体无紫色为止，约半分钟，流水冲洗，甩干。 第七步 复染 加稀释石碳酸复红数滴，一分钟后流水冲洗，用滤纸吸干玻片表面的水。 正常情况下，细胞的成分与大多数背景染成粉红色， 革兰氏阳性菌染成蓝紫色，革兰氏阴性菌染成红色。 技巧：涂片时从中心向外研磨，用力要均匀，厚度以把涂片放到纸上，透过涂片刚好看到下面纸上的字为宜。 目的： 1.杀死细菌 2.使细菌附着于玻片上 3.维持细菌原有形态 4.改变细菌对染料的通透性 注意：染液必须用水冲洗，而不能直接倒去，以防染液沉渣留在玻片上。 在这一步中，碘液作为媒染剂，它的主要作用是促进染料与细菌的结合，也就是初染时结晶紫与细菌的结合，所以媒染剂又叫助染剂。 这一步在操作中最为关键，脱色时间应以标本涂片厚薄灵活掌握，一般以流下的酒精无紫色为宜。 染色片制备好后， 在油镜下观察结果 革兰氏阴性菌 革兰氏阳性菌 * * 球菌 杆菌 螺形菌 球状、杆状和螺旋状 双球菌 分裂后两个球菌成对排列的为双球菌. 如肺炎双球菌 （1）双球菌 一、 球 菌 脑膜炎奈瑟菌 双球菌 肺炎链球菌 双球菌 (2)链球菌 分裂是沿一个平面进行，分裂后细胞排列成链状. 如乳链球菌 链球菌 链球菌 链球菌 (3)葡萄球菌 分裂面不规则，多个球菌聚在一起，像一串串葡萄。 如金黄色葡萄球菌 葡萄球菌 葡萄球菌 葡萄球菌 (4)四联球菌 分裂是沿两个相垂直的平面进行，分裂，分裂后每四个细胞在一起呈田字形. 如四联微球菌 四联球菌 四联球菌 四联球菌 (5)八叠球菌 按三个互相垂直的平面进行分裂后，每八个球菌在一起成立方体形. 如藤黄八叠球菌 八叠球菌 八叠球菌 二、 杆菌 不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。 炭疽芽胞杆菌 3-10 μm 大 中 大肠埃希菌 2-3 μm 小 布鲁菌 0.6-1.5 μm 杆菌的形态多样 炭疽芽胞杆菌 白喉棒状杆菌 梭状芽孢杆菌 杆菌的形态多样 分枝杆菌 双歧杆菌 球杆菌 链杆菌 棒状杆菌 分枝杆菌 三、螺形菌 弧菌 螺菌 螺杆菌 弧 菌 螺 菌 细菌的革兰氏染色 革兰染色的意义