兔椎间盘髓核细胞.PDFVIP

兔椎间盘髓核细胞 Cat NO.: CP-Rb031 一、产品简介 1. 产品名称：兔椎间盘髓核细胞 2. 组织来源：椎间盘组织 5 3. 产品规格：5×10 cells/T25细胞培养瓶 4. 细胞简介： 兔椎间盘髓核细胞分离椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，分为中 央部的髓核，富于弹性的胶状物质；周围部的纤维环，由多层纤维软骨环按同心 圆排列。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下 的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成， 位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组 织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核，是乳白色半透明胶状体，富于弹性， 为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结 构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含 水量为80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而 松散，位于椎间盘的中央，至成年时位置移至椎间盘的中后部；在成年以前构成 髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨，随着年龄的增 长，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐渐减少，胶原增粗并逐渐被纤维软骨所 替代。 本公司生产的兔椎间盘髓核细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并结合软 5 骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5 ×10 cells/瓶；细胞经Ⅱ型 胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有HIV-1、HBV 、HCV 、支原 体、细菌、酵母和真菌等。 5. 培养基信息： DMEM-F12 、FBS 、软骨细胞生长添加剂、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin 、Streptomycin等 我们推荐使用Procell兔椎间盘髓核细胞专用完全培养基 （产品货号：CM-Rb031 ）作 为体外培养兔椎间盘髓核细胞的培养基。 二、细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片 三、使用方法 在Procell技术部标准操作流程下，兔椎间盘髓核细胞可传5代左右，随着细胞传代 武汉普诺赛生命科技有限公司 网站： 全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱：techsupport@ sales@ 次数的增加，细胞将渐渐失去软骨细胞的特征，3代以内细胞状态最佳；建议您收到细 胞后尽快进行相关实验。 客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。 1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO 、饱 2 和湿度的细胞培养箱中静置3-4h ，以稳定细胞状态。 2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 3. 细胞传代 1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次； 2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下 观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化； 3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全 培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养； 4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。 四、注意事项 1. 培养基于4 ℃条件下可保存3-6个月。 2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。 3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell技术部