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3000rmp离心15分钟;标本为
影响 ELISA试验效果常见问题原因分析及解决办法
ELISA 试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的
各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启
发,提高试验质量。
操作步骤 可能原因 解决办法
选择试 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将
剂 试剂在室温下平衡 3060 分钟。
1.血清或血浆标本分离不好即 1.标本为血清:最好将血液先自
进行加样; 然 存 放 12 小 时 后 , 再 用
3000rmp 离心 15 分钟;标本为
2.手工操作中,加样板过多造成 血浆: 必须使用含抗凝剂的血液
加样后放入孵箱前等待时间过 标本收集管, 采血后必须立即颠
长(特别是室内温度较高时); 倒采血管混合 510 次,放置一
加 样 段时间后,3000rpm 离心 15 分
3.加完标本再加酶试剂时酶溅 钟;若在几天内检测,可放在
出孔外。 28℃冰箱中,若要贮存,则置
于20℃的低温冰箱内。
2.加样后及时放入孵箱。
3.加酶试剂后用吸水纸在酶标
板表面轻拭吸干。
4.如果采用 AT 或其他全自动加
样,最好选择 FAME 或其他后
处理仪器加酶试剂。
5.标本较多时,请分批操作。
1.孵育时未贴封片或加盖,使标 1.贴封片或加盖;
本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,
孵 育 难于清洗彻底; 2.按说明步骤严格控制操作时
间。
2.孵育时间人为延长,导致非特
异性结合紧附于反应孔周围, 难
以清洗彻底。
1.采用手工洗板,孔与孔之间液 1.保证洗液注满各孔,洗板针畅
体交叉。 通,洗完板后最好在吸水纸 (选
择干净、无或少尘的吸水材料)
2.采用半自动洗板机洗板时,洗
洗
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