钙活性蛋白酶抑制因子抗体检测试剂盒(酶联免疫法)说明书.docVIP

钙活性蛋白酶抑制因子抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书 【产品名称】 通用名称：钙活性蛋白酶抑制因子抗体检测试剂盒（酶联免疫法） 英文名称：Test Kit for Calpastatin Autoantibodies (ELISA) 【包装规格】 48人份/盒。 【预期用途】 本试剂盒用于体外定性检测人血清中的钙活性蛋白酶抑制因子抗体（CAST抗体）水平。 CAST是一种内源性抑制因子，在类风湿关节炎（RA）滑膜中过度表达并导致软骨破坏等。CAST抗体的测定有助于血清阴性RA患者的早期辅助诊断，以及RA与血清阴性脊柱关节病的辅助鉴别诊断[8]。 【检验原理】 本试剂盒应用间接酶联免疫吸附实验原理。在微孔板预包被CAST抗原，加入样本稀释液及待检样本进行温育，样本中存在的CAST抗体与包被抗原形成“包被抗原-抗体”复合物，洗板去除不与包被抗原结合的物质；加入酶结合物（辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体）进行第二次温育，酶标二抗将与“包被抗原-抗体”复合物结合，形成“包被抗原-IgG抗体-酶标二抗”复合物；再次洗板后加入显色剂，复合物上连接的HRP催化显色剂反应，生成蓝色产物。终止反应后，变为黄色。若样本中无CAST抗体，不显色。 【主要组成成分】 表1. 钙活性蛋白酶抑制因子抗体检测试剂盒（酶联免疫法）组成成分 组成成份名称 数量 主要成分 1.CAST包被板 4×12孔 固相化CAST抗原 2.CAST抗体阴性对照质控 150μl×1支 CAST抗体阴性的混合人血清 3.CAST抗体阳性对照质控 150μl×1支 CAST抗体阳性的混合人血清 4.样本稀释液 6ml×1瓶 含10%小牛血清和0.05%硫柳汞的0.01M pH 7.4 PBS 5.酶结合物（CAST抗体用） 6ml×1瓶 辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgG抗体 6.显色剂A 3ml×1瓶 3，3，5，5-四甲基联苯胺（TMB） 7.显色剂B 3ml×1瓶 H2O2 8.终止液 3ml×1瓶 2M H2SO4 9.浓缩洗涤液（30×0.01MPBST） 15ml×1瓶 Tween-20 , 30×0.01MPBS 10.自封袋 1个 11.封板膜 2张 注：不同批号的包被板、阴阳性对照质控、酶结合物不可互换。其他组份在有效期内可以互换。 【储存条件及有效期】 1. 储存条件：2～8℃避光贮存。 2. 有效期：12个月。 3. 打开后的包被板条用自封袋密封，2～8℃避光贮存不超过2周。 【适用仪器】 含波长450nm的酶标仪。 【样本要求】 1. 本试剂使用的样本为人血清。 2. 不能检测含有叠氮钠的样本，因叠氮钠抑制辣根过氧化物酶的活性；不能检测含有悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样本。 3. 样本中应无微生物。无菌分离的样本可在2～8℃贮存1周，低于-18℃贮存三周，避免反复冻融。 4. 使用前请将样本置于室温（10～30℃）平衡30分钟以上，冷冻样本实验前需解冻至室温（10～30℃）并混匀。 【检验方法】 1. 配液： 用蒸馏水或去离子水将1瓶浓缩洗涤液全部稀释至450ml。 2. 编