内弯宫脂线虫环介导等温扩增联合横向流动试纸条检测方法的建立.pdfVIP

第39卷第2期 中国预防兽医学报 V01．39．No．2 2017年2月 ChineseJoumalofPreventive Feb． 2017 Vete血a可Medicine doi：10．3969巧．issn．1008-0425．2017．02．13 内弯宫脂线虫环介导等温扩增联合横向流动试纸条 检测方法的建立 乔艳-，周前进1，李孝军2，陈炯P (1．宁波大学生物技术系，浙江宁波315211；2．舟山出入境检验检疫局，浙江舟山316000) 摘 为检测靶标，设计了3对特异性引物(其中上游内引物由生物素标记)进行LAMP扩增反应，产物与经异硫氰酸荧 虫，对简单异尖线虫等8种其它常见鱼类寄生蠕虫检测呈阴性。对含有内弯宫脂线虫rDNA—ITs2序列的重组质 敏度为单条虫体基因组DNA的10*倍。优化后LAMP检测时程仅40min。对实际样品的检测结果表明， 敏、高效地检测出内弯宫脂线虫，具有在该线虫的检验检疫中良好的应用前景。 关键词：内弯宫脂线虫；环介导等温扩增；横向流动试纸条；检测 中图分类号：S852．7 文献标识码：A detection adu，1cu，71 Rapid of邯括，．0折y7acfum by iSOthermal cOmbinedw．thIateraIflOw amp|ifiCatiOn dipStick Xiao—Jun2，CHEN QIA0Yanl，ZHOUQian—Jinl，LI Jion91+ of 3152 UniVers时，Nin加o1l，China； (1．DepartmentBiologicalScienceTeclulology，Nin曲o 2．Zhoushan and Bureau，Zhoushan316000，China) Entry—ExitInspectionQuamntine Abstract：IIlthe isomennal combinedwima lateralnow presentstudy，aloop-mediatedamplification(LAⅣⅢ)method for detection of were forthe pairsprimersdesignedusage dipstick(LFD)wasdevelopedrapid Hysfem出，妇cju脚aduncum．Three ofLAMP theintemaltranscribed ribosomal the forward reaction，targeting spacer2(ITS2)ofDNA(rDNA)．Amongprimers，the inner LAMP was withaFITC一1abeledandme was