细胞转染试剂产品销售专员培训资料.pptVIP

转染方法介绍： 显微注射法 电穿孔法 (Amaxa) Biolistic 颗粒传递法?（基因枪粒子轰击法） 磷酸钙法 阳离子脂质体法（Invitrogen，Roche，Qiagen ） 阳离子聚合物 (Sunma梭华，凯基，polyplus) 转染的应用： 基因组功能研究：基因表达调控，蛋白功能，信号转导和药物筛选研究 建立细胞系：转基因细胞模型、永生性细胞株 建立转基因动物模型 基因治疗研究和应用 蛋白功能和定位研究 重组蛋白生产及蛋白药物研究 细胞转染难易比较 PolyPlus-transfection是法国一家专门致力于研发和销售转染试剂的生物技术公司 PolyPlus-transfection公司简介 产品系列 Proteinantibody 转染 ------ PULSin SiRNA 体外转染 ------ INTERFERin DNASiRNA 体内转染 ------ in vivo jetPEI DNA 体外转染 ------ in vitro jetPEI Proteinantibody转染 protein 转染难题 Mass Charge Purity Stability 3D structure Release 技术原理 选择、设计、合成siRNA双链 化学合成siRNA 质粒表达siRNA 转染siRNA到靶细胞 瞬时表达—— 化学合成siRNA，质粒表达siRNA 稳定表达—— 质粒表达siRNA 分析检测RNA干扰作用 蛋白水平: WB/ IF/ FC mRNA水平: 实时定量RT-PCR，northern blotting INTERFERin优势 低浓度 siRNA（甚至pmol级别）就能达到高效的基因沉默 在很多细胞系中，基因沉默效率可达到90％以上 在原代细胞中也能达到有效的基因沉默效率 无细胞毒性 不受血清和抗生素的影响 操作简单 价格便宜 在反向操作转染中的效率高 siRNA 转染竞争对手 Lipofectamine 2000 （ Invitrogen） Oligofectamine （ Invitrogen） HiPerFect （Qiagen） SiLentFect （BioRad） INTERFERin vs Lipofectamine 2000 INTERFERin vs Oligofectamine INTERFERin vs HiPerFect/ SiLentFect INTERFERin?与HiPerFect/ SiLentFect基因沉默效率 in vivo jetPEI vs Viruses in vivo jetPEI : easy to be used not immunogenic not toxic can delivered oligonucleotides up to very large DNA… … but also siRNA jetPEI优势 价格优势（低10%-20%） 实验操作简易 与血清和抗生素兼容性好 稳定性好(质子海绵假说） 、毒性低 规格齐全，能满足不同客户需求 保质期长达一年 jetPEI DNA转染竞争对手 Lipofectamine 2000 (Invitrogen) Fugene 6 (Roche) Effectene (Qiagen) CaPO4 jetPEI vs Lipofectamine 2000 jetPEI vs Fugene 6(Roche) jetPEI vs Effectene(Qiagen) jetPEI vs CaPO4 推广策略 一、寻找客户 二、了解客户 二、了解客户 三、总结 A549-GL3Luc (24-well plate) Luciferase INTERFERin?与HiPerFect/ SiLentFect细胞毒性 A549-GL3Luc (24-well plate) 1 nM siRNA No cellular toxicity observed with INTERFERin? HiPerFect INTERFERin? SiLentFect? 体内 DNAsiRNA转染: ------in vivo jetPEI 产品系列三 体内 转染 体内