注射用脑蛋白水解物质量标准.pdfVIP

附件4： 注射用脑蛋白水解物 Zhusheyong Naodanbai Shuijiewu Cerebroprotein Hydrolysate for Injection 本品为猪脑蛋白水解物溶液（供注射用）与适宜的赋形剂制成的无菌冻干品。每瓶含总 氮（N ）应为标示量的90.0 ％～110.0％，含总氨基酸（以氮计）应为总氮的85 ％～100％， 含肽（以氮计）应不低于总氮的20 ％。 【性状】 本品为白色至淡黄色疏松块状物或粉末。 【鉴别】 （1）取本品适量，加水溶解并制成每1ml 中约含6mg 的溶液，取2ml，加 双缩脲试液（取硫酸铜0.75g 和酒石酸钾钠3.0g，加水250ml 使溶解，在搅拌下加入10%氢 氧化钠溶液150ml，加水至500ml ）4ml ，应显紫红色。 （2 ）在肽含量测定项下记录的游离氨基酸色谱图中，供试品溶液色谱图中各氨基酸峰 的保留时间应与相应对照品峰的保留时间一致。 （3 ）取本品，按标示量加水溶解并制成每 1ml 中约含6mg 的溶液，作为供试品溶液。 另精密称取脑蛋白水解物对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml 中约含总氮6mg 的溶液， 作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010 年版二部附录V D ）测定。以十八烷 基硅烷键合硅胶为填充剂 （柱长250mm，内径4mm ，粒径5μm）；以0.1%三氟醋酸溶液为 流动相A ；以0.085 ％三氟醋酸乙腈溶液－0.1%三氟醋酸溶液（80:20）为流动相B ，按下表 进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml ；检测波长为276nm 。 时间（分钟） 流动相A （% ） 流动相B （% ） 0 100 0 40 50 50 45 0 100 53 0 100 55 100 0 65 100 0 精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按中 药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品溶液的色谱图与对照品溶液色谱图的相似度 （扣除色氨酸峰后）不得低于0.9 。 【检查】酸碱度 取本品，按标示量加水溶解并稀释制成每1ml 中约含6mg 的溶液， 依法测定（中国药典2010 年版二部附录VI H ），pH 值应为6.9～7.5 。 溶液的澄清度与颜色 取本品5 瓶，分别按标示量加水制成每1ml 中含6mg 的溶液， 依法检查（中国药典2010 年版二部附录IX B 和IX A 第一法），溶液应澄清无色；如显色， 与黄色6 号标准比色液比较，均不得更深。 蛋白质 取本品，按标示量加水制成每1ml 中含6mg 的溶液，取5ml，加20%磺基水 杨酸溶液2ml，混匀，溶液不得出现浑浊。 高分子杂质 照分子排阻色谱法（中国药典2010 年版二部附录V H ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用亲水高效体积排阻硅胶为填充剂（如： TSK GEL 2000SWxl，柱长 300mm，内径 7.8mm，粒径 5μm ；或性能相当的色谱柱）；以三氟乙酸- 乙腈-水（0.05 ：40 ：60 ）为流动相，流速为每分钟0.7ml ；检测波长为214nm 。理论板数按 核糖核酸酶A 峰计算不得低于5000，各相邻峰之间的分离度按峰高与峰谷之比计算均不得 小于3.0 。 标准曲线的制备 取核糖核酸酶A(分子量13700)、胰岛素(分子量5808)、胸腺肽α1(分 子量3108)、生长激素释放抑制因子(分子量 1638)各适量，分别用流动相溶解并定量制成每