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南京建成生物工程研究所(本试剂盒仅用于科研)
维生素 E 测试盒说明书
(货号:A008)
一、实验仪器:
玻璃试管、微量移液器、旋涡混匀器、离心机、可见分光光度计(波长 533nm)。
二、适用范围:
本试剂盒可测动植物组织、血清(浆) 、细胞、药物、饮料、口服液、食品等样本中的VE含量。
三、测定意义:
VE是天然脂溶性抗氧化剂,存在细胞膜性结构(细胞膜、线粒体膜、微粒体膜),脂肪细胞的脂滴
和血浆的脂蛋白中,它是单线态氧及超氧阴离子自由基的清除剂,是机体脂质过氧化的阻断剂,并可
保护蛋白巯基。
四、操作表:
1、血清(浆)正庚烷维生素 E 的抽提:
空白管 标准管 测定管
血清(浆)(ml) 0.1
双蒸水(ml) 0.4 0.3 0.3
12µg/ml V 标准品 (ml) 0.1
E
无水乙醇(ml) 0.6 0.6 0.6
漩涡混匀 20秒(蛋白沉淀)
正庚烷(ml) 1.2 1.2 1.2
旋涡混匀(充分抽提)1分钟,然后 3000~4000 转/分,离心 5~10 分钟。
[注]:观察试管内液分为三层,最上层为正庚烷维生素E抽提液,第二层为水及无水乙醇,
最下层为蛋白沉淀物。
2、显色反应:
空白管 标准管 测定管
V 正庚烷抽提液(ml) 0.8 0.8 0.8
E
试剂一(ml) 0.1 0.1 0.1
试剂二(ml) 0.05 0.05 0.05
混匀,立即记录时间,准确静置 5 分钟
试剂三(ml) 0.05 0.05 0.05
混匀(10 秒左右)
无水乙醇(ml) 1 1 1
混匀,静置 2 分钟后,533nm 处,1cm光径比色皿,无水乙醇调零,测各管吸光度值。
五、计算公式:
V 含量 测定 值 空白OD值 标准品浓度 样本测试前
E OD −
=× ×
标准OD值 空白OD值
g ml − 稀释倍数
(μ / ) ( )
12μg/ml
公司地址:南京市玄武区中央路 258-27 号新立基大厦 邮政编码:21
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