维生素E测试盒说明书.PDF

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南京建成生物工程研究所(本试剂盒仅用于科研) 维生素 E 测试盒说明书 (货号:A008) 一、实验仪器: 玻璃试管、微量移液器、旋涡混匀器、离心机、可见分光光度计(波长 533nm)。 二、适用范围: 本试剂盒可测动植物组织、血清(浆) 、细胞、药物、饮料、口服液、食品等样本中的VE含量。 三、测定意义: VE是天然脂溶性抗氧化剂,存在细胞膜性结构(细胞膜、线粒体膜、微粒体膜),脂肪细胞的脂滴 和血浆的脂蛋白中,它是单线态氧及超氧阴离子自由基的清除剂,是机体脂质过氧化的阻断剂,并可 保护蛋白巯基。 四、操作表: 1、血清(浆)正庚烷维生素 E 的抽提: 空白管 标准管 测定管 血清(浆)(ml) 0.1 双蒸水(ml) 0.4 0.3 0.3 12µg/ml V 标准品 (ml) 0.1 E 无水乙醇(ml) 0.6 0.6 0.6 漩涡混匀 20秒(蛋白沉淀) 正庚烷(ml) 1.2 1.2 1.2 旋涡混匀(充分抽提)1分钟,然后 3000~4000 转/分,离心 5~10 分钟。 [注]:观察试管内液分为三层,最上层为正庚烷维生素E抽提液,第二层为水及无水乙醇, 最下层为蛋白沉淀物。 2、显色反应: 空白管 标准管 测定管 V 正庚烷抽提液(ml) 0.8 0.8 0.8 E 试剂一(ml) 0.1 0.1 0.1 试剂二(ml) 0.05 0.05 0.05 混匀,立即记录时间,准确静置 5 分钟 试剂三(ml) 0.05 0.05 0.05 混匀(10 秒左右) 无水乙醇(ml) 1 1 1 混匀,静置 2 分钟后,533nm 处,1cm光径比色皿,无水乙醇调零,测各管吸光度值。 五、计算公式: V 含量 测定 值 空白OD值 标准品浓度 样本测试前 E OD − =× × 标准OD值 空白OD值 g ml − 稀释倍数 (μ / ) ( ) 12μg/ml 公司地址:南京市玄武区中央路 258-27 号新立基大厦 邮政编码:21

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